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CDR3取代型γδTCR文献资料
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特异性CDR3区取代型γδTCR转染细胞的构建及生物学功能鉴定
目的:建立特异性CDR3区取代型γδTCR转染细胞平台.方法:利用搭桥PCR的方法将已知的γδT细胞克隆DBS4.3特异性CDR3编码序列嵌入到γ9和δ2cDNA序列中,取代原有的CDR3区序列,获得的全长γ9和δ2链分别插入真核表达载体pREP7和pREP9中,共转染J.RT3-T3.5细胞,双压力抗生素筛选获得表达特异性γδTCR的转染细胞,通过ELISA和Realtime PCR检测该转染细胞在接受抗原刺激后IL-2的分泌情况.结果:ELISA和Realtime PCR结果显示表达DBS4.3特异性γδTCR的转染细胞在DBS4.3特异性抗原仲丁胺和抗γδTCR抗体刺激作用下,活化分泌IL-2.结论:构建了特异性CDR3区取代型γδTCR转染细胞平台,为研究γδTCR识别抗原的机制奠定了基础.
关键词： γδT细胞 CDR3取代型γδTCR 抗原识别
