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负染电镜文献资料
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腹泻病患者感染小圆结构病毒的检测、鉴定与初步调查
以兔抗小圆结构病毒(SRSV)超免疫血清作为包被抗体,建立了可对腹泻粪便样品中SRSV进行直接检测的间接ELISA方法.应用该方法,对北京地区1998～1999年秋冬季收集到的45人份的腹泻粪便样品,进行了SRSV存在情况的检测及腹泻人群中SRSV感染情况的初步调查.结果表明,有1份粪便样本呈SRSV强阳性,有2份为微弱阳性.经负染电镜观察进一步鉴定,在ELISA强阳性样本中可见到典型的SRSV样病毒颗粒.两种方法均可在腹泻粪便样品中检测鉴定出SRSV的存在,并反映出在北京地区1998～1999年秋冬季人群中有SRSV散发感染的情况,且SRSV感染占腹泻发病患者的比例约为2.2%.
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鲍曼不动杆菌外膜囊泡的提取、纯化及活性检测
目的 提取并纯化鲍曼不动杆菌(AB)标准株ATCC17978的外膜囊泡(omv),观察其形态、结构并检测其活性.方法 常规培养鲍曼标准株,Optiprep密度梯度超速离心提取并纯化其omv,经负染电镜检测omv形态;BCA法检测omv总蛋白浓度,SDS-PAGE分析蛋白相对分子质量大小;用纯化的omv和蛋白酶K处理后的omv分别刺激人肺癌上皮细胞A549,同时用设不加omv的A549细胞做对照,酶链免疫吸附(ELISA)法检测炎性因子白细胞介素(IL)-8表达水平.结果 鲍曼不动杆菌分泌的omv为10～200 nm的球状囊泡结构;其合有的总蛋白浓度为43.2 mg/mL;ELISA结果提示,鲍曼不动杆菌分泌的omv可刺激A549细胞产生炎性因子IL-8,且产生水平与omv剂量呈正比.结论 纯化的鲍曼不动杆菌的omv为10～200 nm的双层囊泡结构,内含多种毒力蛋白,能刺激人肺癌上皮细胞A549产生IL-8.
