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  • 不同生长阶段的烟曲霉对果蝇自噬水平的影响

    作者:崔北金;戴京京;陆军;陈恒;李红;王新洋;叶松

    目的 探究不同生长阶段的烟曲霉对果蝇自噬水平的影响.方法 用沙保弱平板培养烟曲霉,收获静息孢子;用沙保弱液体培养基震荡培养烟曲霉,在不同时间收获膨胀孢子、菌丝.以3种形态的烟曲霉分组处理转基因果蝇,组织切片观察烟曲霉形态,Rt-PCR(逆转录PCR)检测自噬相关蛋白LC3BⅡ、Beclin-1 mRNA的转录水平,Western blot检测LC3BⅡ、Beclin-1的表达量.结果 组织切片观察菌的形态与注入时的形态相符,Rt-PCR检测LC3BⅡ、Beclin-1 mRNA的转录水平升高,同时,感染膨胀烟曲霉孢子及菌丝组的果蝇LC3BⅡ、Beclin-1蛋白的表达水平升高.结论 烟曲霉膨胀孢子及菌丝能显著提高果蝇自噬水平,而静息孢子不能引起果蝇自噬应答.

  • 维生素D对烟曲霉感染的肺巨噬细胞自噬机制的初步研究

    作者:戴京京;王兵;周武碧;张乐

    目的 探究维生素D在鼠肺细胞感染烟曲霉后对细胞自噬的影响.方法 用一定量的烟曲霉活化孢子感染细胞后, 一组细胞加入维生素D (维生素D组), 一组细胞加入生理盐水, 感染一定时间后用溶酶体探针检测自噬相关分子的表达;收集各组细胞并裂解细胞, 离心取上清, 用Western-blot法检测上清液中的LC3BII、Dectin-1及ROS的表达水平.结果 活化的孢子感染肺巨噬细胞后, 维生素D组自噬体与溶酶体共定位减少、吞噬孢子的速率在减少以及ROS水平降低, 其对应的胞内Dectin-1、ROS、LC3BII减少且差异有统计学意义.结论 烟曲霉感染肺巨噬细胞后, 维生素D可通过减弱细胞自噬体与溶酶体的融合并下调自噬信号通路蛋白的表达以达到抵抗烟曲霉感染的作用.

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