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pBABE-neo载体文献资料
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细胞色素P450 1A1-Wt和Asn461、Vla462真核表达载体的构建及人胚肺成纤维细胞转染
目的 构建能够高效表达细胞色素P450 1A1(CYP 1A1)蛋白的细胞株,分析不同基因型蛋白表迭的差异. 方法 首先将已经建立的T载体中CYP1A1-Wt和Asn461、Val462的CYP1A1片断重组至pBABE-neo载体上,转染入人胚肺成纤维细胞(HLF),G418筛选获得阳性细胞,Western-Blot检测CYP1A1蛋白的表达,观察细胞形态,生长曲线,恶变性等生物学特性的改变. 结果 CYP1A1野生型、变异型转染的HLF细胞均能高效表达CYP1A1蛋白,其生物学特性与正常细胞无显著差异,也不属于恶性细胞. 结论 通过细胞转染和筛选获得了表达CYP1A1蛋白的细胞株.
