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pGenesil-1表达载体文献资料
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小干扰RNA对人类风湿关节炎患者滑膜细胞基因表达的影响
背景：类风湿关节炎的病因尚不十分明确，但核转录因子κB在类风湿性关节炎发病中的作用，己逐渐引起风湿病学者的关注。
目的：通过RNA干扰技术阻断人类风湿关节炎滑膜细胞核转录因子κB信号通路，探索其在类风湿关节炎治疗中的应用前景。
方法：分离、消化、培养滑膜细胞备用。根据小分子干扰RNA设计原则，确定核转录因子κB的小分子干扰RNA 四条目标基因序列，合成并构建核转录因子κB小分子干扰RNA表达载体。将构建好的4条pGenesil-1/核转录因子κB小分子干扰RNA表达载体转染入生长状态良好的一代滑膜细胞，并设立空白和阴性对照组。收集转染后12 h、24 h、48 h、72 h、5 d、7 d不同时间段的细胞，并提取RNA。测定细胞内核转录因子κB mRNA相对表达水平，筛选出有效抑制核转录因子κB mRNA表达的小分子干扰RNA质粒载体。
结果与结论：核转录因子κB在人类风湿关节炎滑膜细胞高表达，3#pGenesil-1/核转录因子κB能显著抑制人类风湿关节炎滑膜细胞核转录因子κB mRNA表达。RNA干扰技术可阻断核转录因子κB mRNA的表达，因此，可将阻断核转录因子κB信号通路作为基因治疗类风湿关节炎的靶点。
