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  • 剪碎法及匀浆法制备兔肌肉VX2肿瘤单细胞悬液的方法比较

    作者:高斌;贺克武;李嘉嘉

    目的:比较剪碎法和匀浆法制备兔肌肉VX2肿瘤单细胞悬液的效果.方法:实验于2006-10-25/2007-04-01在安徽医科大学第一附属医院中心实验室进行.切取兔肌肉VX2肿瘤组织块,分别采用剪碎法和匀浆法制备兔肌肉VX2肿瘤单细胞悬液.经苏木精-伊红染色,光学显微镜观察细胞形态学差异,并行Annexin V/PI双染法,流式细胞仪分析细胞凋亡率和细胞坏死率的差异.结果:①细胞形态:匀浆法细胞产率高,细胞形态完整,细胞分布均匀,细胞碎片及细胞团较少;而剪碎法所得细胞悬液在光镜视野中有较多的杂质和细胞团,完整的细胞相对较少.②流式细胞仪分析结果:匀浆法制备的单细胞悬液左下象限正常细胞分布较集中,右下象限凋亡细胞较少,左上象限坏死细胞及细胞碎片较少;所得细胞凋亡率和细胞坏死率值明显低于剪碎法[细胞凋亡率:(8.90±1.24)%,(15.75±1.53)%;细胞坏死率(35.22±1.56)%,(40.16±1.68)%,P均<0.01].结论:用匀浆法制备兔肌肉VX2肿瘤单细胞悬液优于剪碎法.

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