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细胞培养 /方法文献资料
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不同培养条件对神经干细胞分化的影响
目的:观察在不同血清浓度的诱导条件下神经干细胞定向分化为两类不同神经细胞的情况. 方法:通过无血清培养的方法,将原代培养所获得的神经干细胞克隆经传代纯化后,分别接种在加入 Neural Basal,DMEM/F12+ 50 g/L胎牛血清以及 DMEM/F12+ 100 g/L胎牛血清 3种不同的培养基的培养皿中, 7 d后进行 NF-200,GFAP免疫双标染色,在显微镜下随机选取 20个视野,记数神经元和胶质细胞的比例.并进行统计学处理. 结果:在无血清、 50 g/L以及 100 g/L胎牛血清浓度下,神经元与胶质细胞的比例分别为: 65%: 35% ,45%: 55% ,33%: 67%.在无血清和低血清浓度下,所分化的胶质细胞为原浆型星形胶质细胞,而在高血清浓度下则分化为纤维型星形胶质细胞. 结论:血清浓度的高低决定了神经干细胞分化为神经元和胶质细胞的比例,并且对所分化的胶质细胞的种类也有影响.在无血清条件下神经干细胞趋向于向神经元分化.
