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不同培养条件对神经干细胞分化的影响
目的:观察在不同血清浓度的诱导条件下神经干细胞定向分化为两类不同神经细胞的情况. 方法:通过无血清培养的方法,将原代培养所获得的神经干细胞克隆经传代纯化后,分别接种在加入 Neural Basal,DMEM/F12+ 50 g/L胎牛血清以及 DMEM/F12+ 100 g/L胎牛血清 3种不同的培养基的培养皿中, 7 d后进行 NF-200,GFAP免疫双标染色,在显微镜下随机选取 20个视野,记数神经元和胶质细胞的比例.并进行统计学处理. 结果:在无血清、 50 g/L以及 100 g/L胎牛血清浓度下,神经元与胶质细胞的比例分别为: 65%: 35% ,45%: 55% ,33%: 67%.在无血清和低血清浓度下,所分化的胶质细胞为原浆型星形胶质细胞,而在高血清浓度下则分化为纤维型星形胶质细胞. 结论:血清浓度的高低决定了神经干细胞分化为神经元和胶质细胞的比例,并且对所分化的胶质细胞的种类也有影响.在无血清条件下神经干细胞趋向于向神经元分化.
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骨髓间质干细胞对血管性痴呆大鼠长时程增强的影响
目的采用神经电生理方法观察静脉注射骨髓间质干细胞 (marrow stromal cell,MSC)对血管性痴呆 (vascular dementia,VD)大鼠脑长时程增强 (long- term potentiation,LTP)的影响.方法体外分离培养、扩增成年大鼠 MSC.利用结扎双侧颈总动脉方法制备慢性前脑缺血动物模型,检测注射 MSC后 30, 60 d海马齿状回 LTP变化.结果造模 30和 60 d后, VD大鼠 LTP诱导率 (25%, 38% )、群体电位 (PS)平均振幅 [(0.91± 0.13),(1.02± 0.11) mV]与正常对照组 [88% ,(1.31± 0.12),(1.36± 0.14) mV]相比差异有显著性意义 (χ 2=4.2～ 16.25,P< 0.01).静脉注射 MSC后 30和 60 d, VD大鼠 LTP诱导率 (50%, 63% )、 LTP振幅 [(1.21± 0.11),(1.32± 0.18) mV]较模型组有显著改善 (P< 0.01).高频刺激后 60 min时各组间产生 LTP的 PS潜伏期分别为:正常组 (4.8± 1.0) ms,模型组 (5.2± 1.3) ms, MSC组 (4.9± 1.8) ms.模型组的潜伏期较正常组显著延长 (P< 0.05), MSC组潜伏期较模型组缩短 (P< 0.05). 结论静脉注射 MSC可显著易化 VD大鼠海马齿状回 LTP.
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HD02对前脑缺血大鼠神经干细胞增殖分化蛋白的作用
目的观察神经干细胞( neural stem cell ,NSC)增殖分化相关蛋白 Notch1、 hes5 、 Mash1 、 NeuroD在 HD02促进慢性前脑缺血大鼠 NSC增殖分化中的作用.方法雄性 SD大鼠 30只,分为正常对照组( 6只)、模型对照组( 12只)、 HD02组( 12只) ,后两组又分成缺血后 15, 30 d小组,每组各 6只,制作 SD大鼠前脑缺血模型,利用 Western blot方法检测 NSC增殖分化相关蛋白变化.结果与正常对照组比较,造模后 15, 30 d、慢性前脑缺血大鼠 NSC增殖分化相关蛋白表达水平显著升高( t=7.42～ 38.16,P< 0.01);与模型对照组比较, HD02可明显表达明显增加 Notch1,hes5,Mash1,NeuroD表达水平( t=3.17～ 36.55,P< 0.05或 P< 0.01).结论 HD02能增加慢性前脑缺血大鼠 NSC增殖分化相关蛋白表达,这可能与 HD02促进 NSC增殖分化有关.
