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Adenovirus-LacZ文献资料
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携带LacZ的腺病毒载体在牵引骨痂局部转染成纤维细胞和成骨细胞的表达
目的:利用小鼠胫骨牵引成骨动物模型,在牵引成骨过程中局部给予携带了LacZ的腺病毒载体后观察其表达情况,以探讨基因治疗促进骨折愈合的可行性.方法:实验于2004-10/2006-01在中南大学湘雅三医院完成.①实验分组:取雄性8周龄CD-1小鼠20只,随机数字表法分为实验组和对照组,每组各10只.②实验方法:所有小鼠接受左胫骨中上段骨干横行截骨安置特制延长外固定架,胫骨牵引过程包括5 d静止期,10 d牵引期,牵引速率为0.1 mm/次,2次/d,共0.2 mm/d.牵引期第7天实验组牵引骨痂局部注射5 μL携带了LacZ的腺病毒载体,对照组局部注入等量未含LacZ腺病毒液.③实验评估:注射后第3天麻醉后杀取动物,采集左胫骨标本,分别作组织学检查和组织化学分析.结果:纳入小鼠20只,均进入结果分析.在牵引第10天,牵引骨痂中纤维间区形成,两端的新生骨由骨折两端中心生长延伸.骨髓腔内外可见大量新生骨形成.X-Gal底物染色显示,在实验组新生骨组织内可见大量细胞呈阳性染色;而对照组未发现阳性染色细胞.结论:在牵引成骨过程中,骨痂局部注射携带LacZ的腺病毒,能成功转染局部的成纤维细胞及成骨细胞,并表达LacZ基因,为临床应用基因治疗促进骨牵引延长或骨折愈合提供可行性.
