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功能性神经肌肉刺激对犬神经再支配后环杓后肌纤维类型的影响
目的:建立犬喉返神经损伤模型,应用功能性神经肌肉刺激作为喉功能恢复的治疗手段,观察犬环杓后肌肌球蛋白重链成分变化.方法:实验于2002-02/2003-03在郑州大学耳鼻咽喉研究所进行.取健康成年杂种犬6只,第1~5只犬在喉返神经切断后通过直接缝合法吻合神经,其中第1只犬不干预;第2只仅给予喉返神经间断性的功能性神经肌肉刺激,4h/d;第3只给予喉返神经和环杓后肌间断性的功能性神经肌肉刺激,4 h/d;第4只接受功能性神经肌肉刺激,喉返神经为间断性处理,4 h/d,环杓后肌为持续性处理,24 h/d;第5只犬喉返神经和环杓后肌功能性神经肌肉刺激均为持续性,24 h/d.总的时间为2个月.第6只动物在喉返神经切断后,不做吻合及神经肌肉刺激.功能性神经肌肉刺激参数为波宽1 ms、刺激频率30 Hz,刺激强度5~10 V.2个月后第1~5只动物取左侧环杓后肌,第6只动物取左右两侧环杓后肌,ATPase染色观察Ⅰ,Ⅱ型纤维比例,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳及凝胶染色比较犬环杓后肌肌球蛋白重链各成分.结果:①Ⅰ/Ⅱ比例:环杓后肌ATPase染色提示第4,5只犬左侧与第6只犬的右侧接近(0.89,0.96,0.82).第6只犬的左侧环杓后肌中Ⅰ/Ⅱ为1.5.②S十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶图像分析结果:第6只犬左侧环杓后肌中ⅡB型纤维所占比例明显低于ⅡA;第1只犬左侧环杓后肌表现为ⅡA比例增高,ⅡB比例减低;第2只犬左侧环杓后肌ⅡB降低更明显;第4只犬的左侧环杓后肌肌球蛋白重链成分的比例几乎与正常右侧的环杓后肌相同.结论:对失神经支配或支配神经损伤的环杓后肌应用功能性神经肌肉刺激可以有效地维持肌肉中Ⅰ和Ⅱ两种类型纤维的比例,持续应用优于间断应用.