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三氧化二砷对人宫颈癌细胞放射增敏的体外实验
目的:三氧化二砷(As2O3)具有显著的抗肿瘤效应,且已进入临床研究阶段,在体外实验中将其作为生物材料用于人宫颈癌细胞放射效应研究中,探讨其是否具有辐射增敏作用.方法:实验于2006-01/2007-04在重庆医科大学超声研究所(国家级重点实验室)完成.实验分组:①空白对照组(不做任何处理).②单纯照射组:将其8×103个细胞悬浮于新鲜培养液中,在室温下行60Coγ射线照射,平均剂量率为62.89 cGy/min,根据实验要求照射2 Gy.③As2O3组:在培养液中加入1.0μmol/L As2O3共培养.④As2O3+照射组:加入1.0μmol/L As2O3后进行60Coγ射线照射.实验评估:用MTT法及平板克隆形成试验检测各实验组人宫颈癌细胞株HeLa细胞存活分数和集落形成率,AO/EB荧光染色法检测各组细胞凋亡率的变化,流式细胞仪测定Bcl-2蛋白的表达.结果:As2O3+照射组细胞存活分数和集落形成率较As2O3组及单纯照射组明显下降,与As2O3组和单纯照射组比较差异具有显著性(P＜0.01),而As2O3+照射组细胞凋亡率明显增加,Bcl-2蛋白的表达明显下降,与As2O3组或单纯照射组比较差异皆具有显著性(P＜0.01).结论:As2O3对宫颈癌HeLa细胞具有辐射增敏作用,其增敏作用与As2O3增加照射后肿瘤细胞的凋亡率有关.
关键词： 三氧化二砷 人宫颈癌细胞株HeLa 放射敏感性 -
抑制c-raf-1基因对人宫颈癌细胞放射敏感性影响的实验研究
目的:探讨用反义技术抑制癌基因c-raf-1对宫颈癌细胞(HeLa)放射敏感性的影响.方法:设立空白对照组、c-raf-1正义寡核苷酸组和脂质体组(仅加入等量的脂质体)作对照,用RT-PCR检测宫颈癌细胞处理前后c-raf-1表达水平的变化.用集落形成试验检测各实验组照射后人宫颈癌HeLa细胞株集落形成率,AO/EB荧光染色法检测细胞凋亡率的变化,流式细胞仪测定Bcl-2蛋白的表达.结果:c-raf-1反义寡核苷酸能有效抑制c-raf-1癌基因的表达,经脂质体介导的c-raf-1反义寡核苷酸作用的宫颈癌细胞经60Coγ射线照射后其集落形成率较正义寡核苷酸组及单纯照射组明显下降,而凋亡率明显增加,Bcl-2蛋白的表达显著下调,与对照各组比较有显著差异(P＜0.01).结论:c-raf-1反义寡核苷酸通过抑制c-raf-1基因降低人宫颈癌HeLa细胞放射抗性.其辐射增敏作用可能与c-raf-1反义寡核苷酸抑制了辐射抵抗信号转导途径,增加照射后肿瘤细胞的凋亡率有关.
关键词： 人宫颈癌细胞株HeLa c-raf-1 反义技术 放射敏感性
