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诱导多潜能分化干细胞文献资料
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CF-1小鼠胚胎成纤维细胞饲养层的制备
背景:小鼠胚胎成纤维细胞作为干细胞生长用饲养层,优于无饲养层,它能够分泌一些既促进干细胞生长又能抑制干细胞分化的因子.目的:建立CF-1 小鼠胚胎成纤维细胞饲养层佳的分离培养方法,分析丝裂霉素C 抑制成纤维细胞增殖的佳浓度与时间,用于培养诱导多能性干细胞.方法:取孕10~15 d CF-1 小鼠,分离胎鼠原代成纤维细胞,经不同质量浓度(5,10,15,20 mg/L)丝裂霉素C 处理不同时间(1,1.5,2,2.5,3 h)制备饲养层,并观察其增殖情况.将人诱导多潜能干细胞或胚胎干细胞在丝裂霉素C 处理过的饲养层上培养,观察细胞集落生长情况.结果与结论:制备CF-1 小鼠胚胎成纤维细胞饲养层的佳胎龄为13.0~14.0 d.丝裂霉素C 抑制CF-1 小鼠胚胎成纤维细胞增殖的佳浓度及作用时间为10 mg/L,2.5 h,成纤维细胞饲养层可以维持5~7 d.诱导多能性干细胞与胚胎干细胞在经10 mg/L 丝裂霉素C 处理2.5 h 后饲养层上能发育成典型的"鸟巢"状干细胞集落.
关键词： 胚胎成纤维细胞 诱导多潜能分化干细胞 饲养层 丝裂霉素C 细胞集落
