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人类肺腺癌细胞文献资料
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荧光共振能量转移技术对肺腺癌活细胞中消癌平诱导半胱氨酸天冬氨酸酶3活化过程的实时监测
背景:将生物学技术和光学技术结合起来研究细胞增殖和凋亡的分子机制已成为生物工程学领域的研究热点.目的:应用共聚焦荧光显微成像技术和荧光共振能量转移技术在活细胞中观察消癌平诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制.设计:观察对比实验.单位:华南师范大学激光生命科学教育部重点实验室暨激光生命科学研究所.材料:实验于2006-10/2007-03在华南师范大学激光生命科学重点实验室暨激光生命科学研究所进行.人类肺腺癌细胞为本实验室培养.消癌平注射液为通化神源药业有限公司生产(国药准字Z20025869),G418购自华美生物公司.质粒SCAT3由Miura教授提供,酶标仪(infinite M200,Tecan,Austria),线粒体定位荧光探针购于Molecular Probe公司.方法:①利用细胞计数试剂盒技术检测不同剂量的消癌平对人类肺腺癌细胞活性的抑制作用.②利用共聚焦荧光显微成像技术和荧光共振能量转移技术在大半个活细胞中实时检测消癌平诱导半胱氨酸天冬氨酸酶3活化的动态过程.③利用荧光检测技术在活细胞中检测消癌平作用后不同时间点的SCAT3的荧光发射谱.主要观察指标:①消癌平作用细胞后检测细胞的活性.②消癌平作用后实时检测SCAT3荧光共振能量转移效率的动态变化.③消癌平作用后线粒体形态的动态变化.结果:①消癌平剂量依赖性抑制肿瘤细胞的活性.②消癌平诱导细胞内半胱氨酸天冬氨酸酶3的活化.③消癌平诱导细胞中线粒体变圆和破裂.结论:消癌平可以诱导人类肺腺癌细胞的凋亡,半胱氨酸天冬氨酸酶3参与了其调控过程.
