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明胶涂层文献资料
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明胶涂层涤纶片携带组织型纤溶酶原激活因子基因定位转移可能影响兔左房血纤溶的活性吗?
背景:机械瓣膜置换后的抗凝治疗一直是困扰心血管外科医生的难题,因此研制一种不需终生抗凝的机械瓣膜具有重要的现实意义.目的:观察明胶涂层涤纶片(Dacron片)携带组织型纤溶酶源激活因子(tPA)基因左心房局部定位转移对兔左房血纤溶活性的影响,为tPA基因瓣膜的研制奠定基础.方法:48只新西兰大耳白兔随机分为3组:转基因组左心耳植入携带tPAcDNA的明胶涂层的Dacron涤纶片;载体对照组左心耳植入携带载体DNA的明胶涂层的Dacron片,空白对照组左心耳植入不携带任何基因的明胶涂层的Dacron片.术后3,14 d取心肌组织,RT-PCR检测左房局部心肌组织tPAmRNA转录水平,Western-Blot和免疫组化方法检测外源性tPA蛋白表达:术后3,14 d取兔左房血和外周静脉血,底物发色法检测其tPA活性.结果与结论:术后3,14 d,RT-PCR可检测到局部心肌tPAmRNA表达,Wesfern-Blot可检测到tPA蛋白表达,免疫组化见阳性心肌细胞胞浆呈黄褐色,术后3,14 d,转基因组左房血tPA活性明显高于各对照组(P<0.05).3组术后外周血tPA活性差异无显著性意义.说明使用明胶蛋白涂层方法能够将tPA基因成功的转移到左心房,使之在局部持续表达、分泌有活性的tPA蛋白,从而使左房血纤溶活性增强.
