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  • 真菌DNA提取方法的建立和比较

    作者:杨艳秋;王丽;贺丹;孙文通;张宇;横山耕治

    目的:DNA的提取效率,尤其是DNA的纯度严重影响实验结果,同一标本采用不同方法或不同标本采用相同方法提取DNA,其纯度和提取率有很大差异.以丝状真菌为材料,进行DNA提取,对真菌DNA的提取方法进行优化,探讨其佳DNA提取方法.方法:实验于2004-06/2006-12在吉林大学基础医学院真菌实验室进行.以临床常见致病真菌标本为材料,采用玻璃珠-盐析法、CTAB法、Gene TLETM法3种不同方法提取DNA,通过琼脂糖凝胶电泳比较不同方法提取DNA的效率.结果:同等菌体量下,A260和A280的比值采用Gene TLETM法获得的样品高,表明其蛋白质含量相对少.3种提取的基因组DNA琼脂糖凝胶电泳图都在相应的多重PCR体系中扩增出目的片段,Gene TLETM DNA抽提法带型清楚、明亮.结论:Gene TLETM法提取DNA效率高、质量好,操作简单,适于DNA的提取.

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