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淫羊藿苷上调miR-519d表达抑制人SKOV3卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭
目的 淫羊藿苷(Icariin)对人SKOV3卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响以及其可能的机制.方法 针对SKOV3细胞,给予Icariin不同浓度处理不同时间后,采用CCK-8检测细胞增殖的变化;应用realtime PCR方法检测Icariin处理不同时间后miR-519d在SKOV3细胞中的表达变化;利用LipofectAMINE 2000将antimiR-519d以及其阴性对照质粒载体转染至SKOV3细胞,再给予Icariin,分别应用CCK-8法和Transwell小室法检测SKOV3细胞的增殖、迁移及侵袭能力变化.结果 Icariin显著抑制了SKOV3细胞的增殖,并且呈时间和剂量依赖;随时间变化,Icariin显著上调了miR-519d在SKOV3细胞的表达水平;转染anti-miR-519d后,Icariin的作用被阻断,SKOV3细胞的增殖,以及迁移、侵袭能力基本恢复.结论 miR-519d参与了Icariin抑制SKOV3细胞的增殖,迁移和侵袭的调控过程.
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过表达PKM2增加卵巢癌细胞的增殖和迁移
目的 探究人M2型丙酮酸激酶(pyruvate kinase type M2, PKM2)对卵巢癌SKOV3细胞增殖和迁移的影响.方法 将PKM2 Cdna以XhoⅠ和NotⅠ位点克隆入Plvx-Neo-IRES-ZsGreen1 vector慢病毒载体中,得到的重组载体及空载体分别与慢病毒包装质粒psPAX2和Pmd2.G共转染入293T包装细胞,以得到PKM2过表达的慢病毒表达载体;将其转导入SKOV3细胞后用G418筛选稳定转染的细胞,分别测定PKM2过表达前后SKOV3细胞的增殖和迁移的改变.结果 测序鉴定表明PKM2重组慢病毒表达载体正确无误.Western印迹检测结果显示转导PKM2慢病毒表达载体可增加SKOV3细胞中PKM2的表达.MTT测定和细胞划痕实验结果表明过表达PKM2可增加SKOV3的增殖和迁移.结论 PKM2过表达可增加卵巢癌SKOV3细胞的增殖和迁移.
