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参苏饮含药血清诱导炎症人支气管上皮细胞hBD-2mRNA表达中NFκB所发挥作用的实验研究
目的:探讨NFκB在参苏饮诱导炎症16HBE表达hBD-2mRNA中的作用.方法:选择雄性SD大鼠,灌胃给予参苏饮及其拆方药液,心脏采血制备含药血清;传代培养人支气管上皮细胞(16HBE);LPS(1 mg/L)刺激16HBE后不同时间点(3h、6h、12 h、24 h)测定细胞增殖活性及培养上清液中TNF-d、IL-8含量,建立16HBE炎症模型;给药前用PDTC预处理30 min,采用RT-PCR法检测给药后不同时间点(0.5h、1h、3h、5h、8h)细胞hBD-2mRNA的表达情况.结果:PDTC阻断NFκB后,与模型组比较,全方组、益气解表组hBD-2mRNA相对表达量仅在1h显著性升高(P＜0.05);其余均无统计学差异(P＞0.05).结论:PDTC阻断NFκB后,参苏饮诱导炎症16HBE表达hBD-2mRNA明显受抑,表明参苏饮上调hBD-2mRNA表达需要NFκB发挥作用.
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参苏饮含药血清对炎症人支气管上皮细胞表达hBD-2、 TLR4、 NFκBp65mRNA的实验研究
目的 探讨参苏饮含药血清对炎症人支气管上皮细胞(16HBE)表达hBD-2、TLR4、NFκ Bp65 mRNA的影响.方法 选择雄性SD大鼠,灌胃给予参苏饮及其拆方药液,心脏采血制备含药血清;传代培养人支气管上皮细胞(16HBE);LPS(1mg/L)刺激16HBE后不同时间点(3,6,12,24h)测定细胞增殖活性及培养上清液中TNF-α、IL-8含量,建立16HBE炎症模型;采用RT-PCR法检测给药后不同时间点(0.5,1,3,5,8h)细胞hBD-2mRNA、TLR4 mRNA、NFκBp65mRNA的表达情况.结果 与空白对照组比较,模型组的hBD-2mRNA相对表达量在1,3,5h显著性升高(P＜0.05),且在3h达峰值;与模型组比较:全方组及益气解表组的hBD-2mRNA相对表达量在1,3,5h均显著性升高(P＜0.05),且在3h达峰值;止咳化痰组的hBD-2mRNA相对表达量仅在1h、5h显著性升高(P＜0.05),且全方组较益气解表组和止咳化痰组升高明显;与空白对照组比较,模型组的TLR4mRNA相对表达量在3h后显著性升高(P＜0.05);与模型组比较:全方组、益气解表组的TLR4mRNA相对表达量在3h后显著性升高(P＜0.05);止咳化痰组的TLR4mRNA相对表达量在5h后显著性升高(P＜0.05),且全方组较益气解表组和止咳化痰组升高明显;与空白对照组比较,模型组的NFκBp65mRNA相对表达量在1h后显著性升高(P＜0.05);与模型组比较,全方组、益气解表组、止咳化痰组的NFκBp65 mRNA相对表达量在3h、5h显著性升高(P＜0.05).结论 参苏饮能在不同时间点不同程度的上调炎症16HBE细胞表达TLR4 mRNA、NFκBp65mRNA、hBD-2mRNA,且全方组的效应优于拆方组.表明参苏饮能促进hBD-2表达与TLR4-NFκB通路有很大的相关性.
