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亚慢性氟中毒对大鼠骨组织Runx2mRNA表达的影响
目的 观察亚慢性氟中毒对大鼠骨组织中转录因子Runx2 mRNA表达的影响,探讨Runx2在氟骨症发生中的可能作用.方法 40只Wistar大鼠按体重随机分成4组,染氟组大鼠饮用含氟50、100、150mg/L的自来水,对照组大鼠饮用自来水;3个月后测定大鼠血清及骨组织氟含量,并采用SYBR Green Real-time RT-PCR法检测骨组织中Runx2 mRNA表达情况,同时观察骨组织病理学改变.结果 HE染色显示染氟组大鼠呈现骨皮质增厚、骨小梁增多等骨硬化表现;染氟组大鼠骨组织中Runx2 mRNA表达显著高于对照组,且随染毒剂量升高,表达亦逐渐升高.结论 过量的氟可能通过增加骨组织Runx2基因表达水平来促进间充质干细胞向成骨细胞系分化,使骨形成增加.
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神经肽P物质通过诱导RUNX2表达对小鼠成骨细胞增殖能力的影响
目的·探讨神经肽P物质(SP)对转录因子RUNX2表达的调控及其对成骨细胞增殖能力的影响.方法·体外分离C57BL/6J小鼠颅骨来源的原代成骨细胞,通过转染siRNA沉默成骨细胞RUNX2基因的表达.将SP、Spantide(SP抑制剂)、L703606(NK-1受体抑制剂)以及RUNX2 siRNA进行配伍作用于成骨细胞,观察SP对成骨细胞RUNX2表达的调控及对成骨细胞增殖能力的影响.成骨细胞增殖活性的检测采用细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8法).通过real-time PCR和Western blotting技术检测SP对RUNX2在mRNA和蛋白表达水平的调控.结果·CCK-8法检测结果显示,浓度为10-12～10-6 mol/L的SP促进小鼠成骨细胞增殖,10-8 mol/L为其佳浓度.10-8 mol/L SP作用于成骨细胞48 h后,转录因子RUNX2的mRNA和蛋白表达水平较对照组明显升高,Spantide和L703606抑制SP对RUNX2表达的诱导.RUNX2 siRNA降低成骨细胞基础增殖水平,同时也抑制了SP对成骨细胞的促增殖作用.结论·SP通过与NK-1受体结合诱导转录因子RUNX2的表达,进而增强成骨细胞增殖能力.
