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脑膜炎奈瑟菌检测及基因分群
目的 建立多重聚合酶链反应(PCR)技术对脑膜炎奈瑟菌(Neisseria meningitidis,Nm)的快速诊断及分群方法.方法 应用多重PCR技术对本实验室保存的70株已鉴定Nm进行核酸鉴定及基因分群,同时检测23例流行性脑脊髓膜炎(简称流脑)疑似病例脑脊液标本中脑膜炎奈瑟菌特异性DNA片段.用传统的细菌培养法和血清凝集法作对照,比较其特异性.结果 68株Nm的多重PCR检测结果与血清分群结果一致,2株血清未能分群的Nm经多重PCR检测为C群;23例流脑疑似病例脑脊液标本经多重PCR检测有5例为C群,1例为A群,1例为B群,阳性检出率为30.43％.传统的病原分离培养、生化鉴定和血清学鉴定出4例为C群,阳性检出率为17.39％.结论 多重PCR技术对脑膜炎奈瑟菌检测的特异性优于传统的细菌培养法以及血清凝集法.
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脑膜炎奈瑟菌基因分群方法建立与评价
目的 建立流脑实验室快速诊断及基因分群方法,进行群别分布研究及分群效率评估.方法 应用多重PCR进行同步核酸鉴定及基因分群.平板菌落计数法评估敏感性,基因序列分析确定特异性.结果 PCR敏感性为83个菌落形成单位(CFU)/反应;多重PCR分群效率(100%)优于血清凝集法(82.02%).差异有统计学意义.其中带菌者分离株基因分群效率为100%,血清凝集法为65.71%;对与血清凝集分群法结果不同的菌株进行基因测序,分析结果与PCR分群结果相符;分离株菌群分布为A群60.69%,B群24.69%,C群14.62%,未检出其他群别.结论 所建立的基因鉴定及分群方法敏感性和特异性均优于血清凝集法,分群效率优于血清凝集法.
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金黄色葡萄球菌基因分群方法研究
目的 建立快速、准确的金黄色葡萄球菌实验室诊断及基因分群方法 并进行群别分布研究.方法 应用多重PCR技术进行同步核酸鉴定及基因分群.应用平板菌落计数法评估敏感性、基因序列分析确定特异性.结果 PCR敏感性为79 CFU/反应;多重PCR分群效率为100%,优于血清凝集法的79.78%(χ2=15.451 4,P＜0.01).其中健康带菌者分离株基因分群效率为100%,优于血清凝集法的65.71%(χ2=8.661 3,P＜0.01).对与血清凝集分群法结果 不同的菌株进行基因测序,结果 与PCR分群相符.结论 多重PCR建立的基因鉴定及分群方法 优于血清凝集法.
关键词： 金黄色葡萄球菌 基因分群 多重PCR 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
