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Spcfl-Like基因文献资料
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亚洲牛带绦虫Spefl-Like基因克隆、表达及纯化
目的 扩增、克隆和表达亚洲牛带绦虫(Taenia saginata aslatica)Spefl-Like基因全长cDNA,并进行表达产物的纯化.方法 以亚洲牛带绦虫成虫cDNA文库中含Spcfl-Like基因的质粒作为模板,扩增该基因,将其克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,测序鉴定重组质粒,在大肠埃希菌BL-21/DE3中用异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,重组后的蛋白用His-镍蛋白纯化柱纯化.结果 PCR,双酶切及DNA测序见过均表明重组质粒pET-28a(+)-Spcfl-Like构建成功,该基因在大肠埃希菌中以上清表达,纯化后蛋白通过SDS-PAGE鉴定结果表明该基因在大肠埃希菌BL-21/DE3得到高效表达.结论 成功克隆了亚洲牛带绦虫Spefl-Like基因,并表达和纯化了Spcfl-Like蛋白,为研究Spefl-Like的功能及其疫苗等研究提供了基础依据.
关键词： 亚洲牛带绦虫 Spcfl-Like基因 基因克隆 原核表达
