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皮肤切片制作的体会
皮肤是大的器官,被覆于人体或动物的全身表面,它由上皮性的表皮及其下结缔组织性真皮组成.表皮和真皮内含有丰富的感觉神经末梢,皮肤及皮下组织内有许多附属器(毛发、皮脂腺和汗腺)[1],因为皮肤组织的组织结构复杂、硬度不一、韧性较大等特点,在切片中常会出现有皱褶、易脱片等现象.皮肤较为坚硬不易切片,在制作切片过程中有一定的难度.本文根据我们长期做皮肤切片的经验,谈谈我们在制作皮肤切片方面的一些体会.
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烧伤皮肤组织制片法的改良
近年来免疫组织化学、原位核酸分子杂交等新技术被广泛地应用于病理学的研究和临床病理诊断,但这些新技术、新方法的应用,都必须建立在高质量的组织制片基础上,否则影响到实验结果.皮肤组织已被公认是难制片的组织之一,而烧伤后的皮肤组织制片则更为困难[1].为提高烧伤皮肤组织制片质量,我们进行了方法学的改进.
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抗原修复法和固定液pH值对切创皮肤免疫组化染色的影响
目的 比较不同抗原修复方法对不同pH混合福尔马林固定液固定的切创皮肤的免疫组化染色效果.方法 小鼠皮肤切创后3d取材,分别用pH为5.0、6.0、7.0、8.0、9.0的混合4%福尔马林固定液固定,经高压锅、微波、胰蛋白酶、胃蛋白酶、微波+胰蛋白酶法对抗原修复,观测caspase-3,caspase-6,caspase-7,IL-8,IL-10的免疫组化染色(SABC法)效果.结果 热修复法阳性细胞率高于蛋白酶修复法,高压修复法阳性细胞率略高于微波修复;高压修复法的脱片现象高于微波修复,胃蛋白酶修复脱片高于胰蛋白酶修复;微波+胰蛋白酶双修复法阳性细胞率高,不发生脱片现象;固定液pH值为7.0和8.0时,阳性细胞率高,染色效果好.结论 pH7.0和8.0混合福尔马林固定液固定的切创皮肤,经微波+胰蛋白酶法修复抗原,免疫组化染色效果佳.
