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焦磷酸测序法和直接测序法检测非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因突变的比较研究

钟焱;周钢

摘要: 目的 比较PCR-直接测序法和PCR-焦磷酸测序法检测表皮生成因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)基因突变的一致性和差异性,探寻适应于临床检测体细胞EGFR基因突变的方法,为非小细胞癌患者的个体化用药提供理论依据.方法 采用双盲的方法应用PCR-直接测序法和PCR-焦磷酸测序法检测13例(17个突变点)已知突变比例DNA样本中EGFR外显子18、19、20和21的突变情况,分析2种检测方法对各种突变的检出率和检准率;另选择实验室收集的100例非小细胞肺癌组织标本,分别采用直接测序法和焦磷酸测序法检测EGFR外显子18、19、20和21的突变情况,结果比较采用卡方检验.结果 2种检测方法对于检测EGFR18、19、20和21的结果差异有统计学差异,但焦磷酸测序法的准确度和灵敏度更高,操作更加简便.结论 与直接测序法相比,PCR-焦磷酸测序法更加适用于临床检测体细胞基因突变,能够更好地识别突变比例较低的组织样本,对临床指导非小细胞肺癌TKI类药物个体化用药与预测其药物疗效都具有重要意义,值得临床进一步推广应用.

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