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靶向整合素αvβ6的光声及荧光成像探针的合成
目的：合成靶向整合素αvβ6的光声成像及荧光成像的双功能探针。方法用吲哚氰绿‐羟基琥珀酰亚胺（ICG‐N HS ）与胱氨酸结肽反应生成 ICG‐结肽探针，用反相高效液相色谱仪（RP‐HPLC）分离出探针，质谱仪及光谱仪检测探针的分子量及大吸收波长；光声成像仪及荧光成像仪检测不同浓度探针的光声信号及荧光信号；评估探针在激光照射下的稳定性；使用整合素αvβ6阳性和阴性的细胞进行细胞摄取实验，从而评估探针对整合素αvβ6的靶向性；评估光声成像及荧光成像所能检测到的少细胞数。结果使用RP‐HPLC将ICG‐结肽从反应液中分离，保留时间为21.4 min ，质谱分析测得分子量为4727，荧光标记率为1∶1；光谱仪测得大吸收波长为790 nm ；探针浓度与其光声信号强度呈线性相关，当探针浓度＜1.5×10－5 mol／L时，其浓度与荧光信号呈线性相关，光声成像与荧光成像能从背景中检测到的探针低浓度分别为0.09×10－5 mol／L和0.05×10－5 mol／L ；对探针进行连续20次激光扫描，每次持续1 min ，其光声信号未见明显减退；αvβ6阳性A431细胞与αvβ6阴性293T细胞对ICG‐结肽探针的摄取在不同浓度及不同孵育时间均存在差异（ P ＜0.001）。加入5μmol／L未标记的结肽可以降低A431细胞对ICG‐结肽探针的摄取（ P ＝0.001）；光声成像和荧光成像可分别检测到低至0.4×106个和0.05×106个ICG‐结肽探针标记的A431细胞。结论靶向整合素αvβ6的光声成像及荧光成像的双功能探针具有良好的靶向性及敏感性，在αvβ6阳性肿瘤早期检测方面有潜在的实用价值。
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靶向乳腺癌细胞的多功能纳米分子探针介导光声成像及治疗
目的 制备一种载Fe3O4同时靶向乳腺癌的多功能纳米分子探针,观察其体外光声成像效果,并探讨其体外寻靶能力及光声介导乳腺癌细胞凋亡的能力.方法 采用双乳化法和碳二亚胺法,制备载Fe3O4同时连接靶向乳腺癌单克隆抗体(Herceptin)的高分子多功能纳米分子探针,检测其一般物理特性、Herceptin与纳米粒的连接情况及其体外寻靶能力;对不同浓度的纳米粒进行光声成像;体外评价靶向纳米粒介导光声对乳腺癌细胞的抑制作用.结果 成功制备的靶向载Fe3O4多功能纳米分子探针平均粒径为(235.40±53.75) nm,Zeta电位(-13.4±4.7) mV;Fe3O4颗粒分布于纳米探针壳层;间接免疫荧光法观察到抗体成功连接到纳米探针表面;体外寻靶能力实验显示乳腺癌SKBR3细胞株周围有大量靶向纳米探针环绕.体外光声成像显示随Fe3O4含量增加,其光声信号逐渐增强.体外细胞抑制实验显示激光辐照后的乳腺癌细胞凋亡率明显升高,证明制备的纳米探针能够协同光声对乳腺癌细胞产生明显的抑制作用.结论 制备的靶向载Fe3O4多功能纳米分子探针可作为光声成像造影剂,同时在光声介导下,能够显著抑制乳腺癌细胞的增殖.
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肿瘤光声成像研究进展
光声成像技术是近年发展起来的无创、无辐射的新型生物医学成像技术,其结合了超声成像的高空间分辨率和光学成像的高对比度,具有较强的组织穿透力,能进行实时分子成像,有良好的临床应用前景.笔者就光声成像的发展及其在肿瘤诊疗中的应用研究进行综述,以期为肿瘤光声成像转化医学研究提供新视角和思路.
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携MAGE靶向金纳米粒光声及超声显像黑色素瘤的实验研究
目的 制备抗黑色素瘤相关抗原(MAGE)抗体偶联的载金纳米棒靶向纳米分子探针,探讨其对体外恶性黑色素瘤细胞的靶向性,观察其体外光声成像效果.方法 采用双乳化法制备包裹金纳米棒和液态氟碳的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米粒,碳二亚胺法连接靶向MAGE的单克隆抗体,制备高分子多功能靶向PLGA纳米分子探针,检测其一般物理特性、MAGE抗体与纳米粒的连接情况及其体外寻靶能力,并观察体外光声成像效果.结果 成功制备的靶向载金纳米棒多功能纳米分子探针平均粒径(336.40±27.46)nm,平均Zeta电位(-4.34±4.9)mV.MAGE抗体与纳米粒有效连接.体外寻靶能力实验显示黑色素瘤B16细胞株周围有大量靶向纳米探针环绕;光声成像显示随金纳米粒含量增加,其光声信号逐渐增强.结论 MAGE抗体偶联金纳米棒纳米分子探针制备成功,对体外恶性黑色素瘤细胞具有较好的生物活性,细胞靶向性较好,且体外光声成像有明显增强信号,可作为光声成像造影剂,进一步行肿瘤靶向光热治疗.
