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炎症反应中巨噬细胞的Siglec-G分子对DAMPs和PAMPs的识别及调节作用
目的:探究巨噬细胞中唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素(Siglecs)家族的成员Siglec-G参与损伤相关分子模式(DAMPs)和病原相关分子模式(PAMPs)识别及其在炎症反应中的调节作用.方法:提取并纯化野生型小鼠腹腔巨噬细胞,用DAMPs中的高迁移率族蛋白Bl(HMGB1)和PAMPs中的脂多糖(LPS)分别刺激24 h,Real-time PCR方法检测细胞中Siglec-G基因的表达,ELISA方法检测野生型和Siglec-G基因敲除小鼠腹腔巨噬细胞培养上清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的分泌情况.结果:HMGB1能够使巨噬细胞中Siglec-G的表达明显升高,而LPS作用后Siglec-G的表达没有明显改变,同时发现,HMGB1作用于Siglec-G敲除小鼠的巨噬细胞后,TNF-α和IL-6的分泌明显增加,而LPS刺激后炎症因子的分泌没有明显改变.结论:巨噬细胞通过表达Siglec-G来识别DAMPs并发挥免疫抑制作用,而其对于PAMPs缺乏识别及调控作用.
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慢性危重症发病机制理论的建立
尽管慢性危重症受到越来越多的重视,目前仍然缺乏有效的防治手段,这很大程度归因于慢重症的发病机制未明.过去的种种学说仅从单一系统解释慢重症的发生、发展,具有明显的局限性.2018年,美国“脓毒症和重症研究中心”提f出了以损伤相关分子模式(damage associated molecular patterns,DAMPs)为核心的“慢性危重症发病机制理论”.该理论将各个系统的相互串联,指出慢重症的发生是多系统功能紊乱相互作用的结果.
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DAMPs和肾脏疾病
DAMPs是机体受到损伤后释放的内源性预警信号,可激活固有免疫系统,联系适应性免疫,介导无菌性炎症.近年来,DAMPs在肾脏疾病领域日益受到关注.为此,本文将对常见DAMPs、DAMPs受体、DAMPs与肾脏疾病的关系等作一综述.
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损伤相关模式分子对人肝癌HepG2细胞增殖能力的影响
目的 观察在DAMPs诱导下人肝癌HepG2细胞增殖能力的变化.方法 将HepG2细胞分为对照组和实验组(10、20、40、80 μl DAMPs处理的HepG2细胞);MTT比色法检测HepG2细胞的增殖能力;实时荧光定量PCR法检测IL-6 mRNA表达的变化;Western Blot法检测HepG2细胞IL-6蛋白的表达情况.结果 HepG2细胞随着DAMPs剂量的递增及时间的延长增殖能力逐渐增强,呈现明显的量效-时效关系,在剂量40 μl,作用时间36 h时细胞增殖能力达到强,差异有统计学意义(P<0.01);选取作用时间为36 h,随着DAMPs剂量的递增,实时定量PCR法检测到HepG2细胞IL-6 mRNA分别为95.55±4.47,171.80±6.60,453.30±14.47,610.59±12.70,441.04±18.91,差异有统计学意义(P<0.01);Western Blot法检测HepG2细胞IL-6蛋白的表达分别为1.47、2.07、2.74、3.44、3.00,差异有统计学意义(P<0.01).结论 DAMPs在一定剂量及时间内促进人肝癌HepG2细胞增殖,并且呈现明显的量效-时效关系.
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DAMPs对人肝癌HepG2细胞增殖能力影响的机制研究
目的:探讨在损伤相关模式分子(DAMPs)诱导下人肝癌HepG2细胞增殖能力变化的发生机制.方法:将HepG2细胞分为对照组,DAMPs组,IL-6 siRNA组,IL-6 siRNA+DAMPs组;MTT比色法检测HepG2细胞增殖能力的变化;实时荧光定量PCR法检测IL 6及STAT3 mRNA的表达;Western blot法测定HepG2细胞STAT3蛋白和磷酸化STAT3蛋白的表达.结果:DAMPs组细胞增殖能力较对照组显著增强,IL-6 mRNA及STAT3 mRNA的表达较对照组显著上调,差异均有统计学意义(P＜0.01);Western bot法检测出四组STAT3蛋白表达无明显差异,而DAMPs组磷酸化STAT3蛋白的表达高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:DAMPs可能通过IL-6/STAT3信号通路促进人肝癌HepG2细胞的增殖.
关键词： DAMPs IL-6/STAT3信号通路 HepG2细胞
