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植物表达载体在三分三发根中的高效表达
目的 建立基于发根培养的三分三Anisodus acutangulus遗传转化体系及在三分三发根中表达外源基因的方法.方法 由种子直接萌发得到无菌苗,建立了三分三的无菌苗培养系统.将植物高效表达载体pCAMBIA1304+导入经过"disarmed"改造的根癌农杆菌C58C1(携带pRiA4质粒),获得了携带外源基因表达载体的重组C58C1工程菌.取生长良好的幼嫩真叶作为外植体,在乙酰丁香酮的诱导下用重组C58C1进行感染,诱导发根.选取在无激素培养基上生长迅速,分支多的发根单克隆进行继代培养.经过3次继代培养,PCR(polymerase chain reaction,聚合酶链式反应)检测用于验证发根型质粒pRiA4和表达型质粒pCAMBIA1304+是否整合到三分三发根基因组内.结果 建立了基于发根培养的三分三遗传转化体系,发根诱导频率达到100%,PCR检测表明pRiA4和pCAMBIA1304+质粒共转化率达到32%.结论 该方法可以用于在三分三发根中高效表达外源基因,为实现基于发根的三分三产托品烷类生物碱的代谢工程奠定了基础.
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先天性上斜肌麻痹治疗
垂直性斜视在临床上并不少见,其中先天性上斜肌麻痹尤为多见.国外报导[1]先天性上斜肌麻痹占25%,后天性上斜肌麻痹占25%,原因不明占50%.国内杨少梅报导,单纯上斜肌麻痹占22%,后天性占25%.先天性上斜肌麻痹可能和水平向斜视同时存在,多见天幼儿.由于发病期较早,垂直性斜视往往不仅局限于麻痹肌作用方向,而且伴其拮抗肌即同侧下斜肌继发性收缩,或其配偶肌——健侧下直肌的作用过强,引起垂直向斜视的共转化.常见的症状是代偿性头位和上斜视.
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通过活化的T细胞、NK细胞和抗血管生成防止乳腺癌的生长
一种在恶性增殖的D2F2小鼠乳腺癌中高表达的转录因子(Fos相关抗原,Fra-1),其相应的DNA疫苗可有效防止乳腺癌的生长.本文通过口服由变性伤寒沙门菌携带的DNA疫苗,显著抑制了小鼠皮下接种的原发性肿瘤和肺转移的发生.该疫苗含小鼠的Fra-1编码基因,融合了突变的多聚泛素,并与小鼠分泌型IL-18共转化.