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Hedgehog信号通路与肿瘤的关系
Hedgehog(HH)信号通路早在果蝇中被发现,它在一系列生物的胚胎发育过程中都有很重要的作用.除此之外,近年来HH信号通路和肿瘤的关系也引起了人们的广泛关注.HH蛋白是一个分泌性的信号蛋白,通过自我剪接过程,可以将一个45 000的前体转变为19 000功能性蛋白.在脊椎动物中,编码HH蛋白的HH基因至少有3个同源基因:Sonic Hodgehog(SHH),Indian Hodgehog(IHH)和Desert Hodgehog(DHH).
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Ⅰ型内含子核酶的研究进展
核酶具有特异识别和切割靶RNA的特点,从而可以抑制一些特异基因产物的表达,而Ⅰ型内含子核酶,不但具有剪切功能,而且可以进行顺式剪接及反式剪接.随着人们对Ⅰ型内含子核酶的功能结构也有了进一步认识,相继用Ⅰ型内含子核酶对p53突变mRNA及镰形红细胞贫血等遗传性疾病致病基因mRNA的修复做了大量的研究,并取得了一定的成果.
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定点诱变自我剪接Ⅰ型内含子核酶
目的验证嗜热四膜虫核酶自我剪接功能,定点诱变Ⅰ型内含子核酶及检测其自我剪接功能.方法PCR扩增嗜热四膜虫核酶基因连入pGEM-T载体,通过重组PCR获得3个非发夹区域定点诱变的Ⅰ型内含子核酶基因,连入pG-EM-T载体,分别进行体外转录.结果嗜热四膜虫核酶及诱变的3个核酶自我剪接功能完全.结论非发夹区诱变的核酶不改变其自我剪接的功能,为以后反式剪接核酶的设计构建提供了更多的选择基础.