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维生素E对P.y17XL感染BALB/c小鼠早期Th1应答的免疫调节作用
目的 探讨维生素E 对致死型约氏疟原虫感染BALB/c 小鼠Th1 免疫应答的调节效应.方法 将6 ～ 8 周、雌性BALB/c 小鼠经腹腔接种1×106 P.yl7XL 寄生的红细胞,并随机分为实验组与感染对照组,实验组于感染前10 d 口服给予VE 预处理.流式细胞术检测感染后第0、3、5 天脾Tregs 的百分含量;ELISA 检测脾细胞培养上清中的IFN-γ、IL-10 的水平;Griess 反应检测脾细胞培养上清中一氧化氮的含量.结果 与正常感染组比较:补充VE 组Tregs 增殖明显增多;补充VE 组IFN-γ和NO 分泌减少,而IL-10 的分泌水平增加.结论 在P.yl7XL 感染早期,VE 预处理可显著抑制Th1 免疫应答效应,从而进一步加剧P.y17XL 感染BALB/c 的死亡进程.
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维生素E对约氏疟原虫感染BALB/c小鼠早期免疫应答的抑制效应
目的:探讨维生素E(Vitamin E,VE)对致死型约氏疟原虫(Plasmodium yoelii 17XL,P.y17XL)感染BALB/c小鼠的免疫调节效应.方法:6~8周、雌性BALB/c小鼠,随机分为实验组和对照组,经腹腔接种1×106 P.y17XL寄生的红细胞,实验组于感染前10天口服给予VE预处理.动态观察两组小鼠的原虫血症水平;流式细胞术检测感染后第0、3和5天脾树突状细胞(Dendritic cells,DCs)亚群和Toll样受体9(Toll like receptor,TLR9)表达水平、以及巨噬细胞和活化T细胞的表达数量.结果:(1)与正常感染组相比较,补充VE加重感染小鼠的原虫血症水平,死亡率于感染后第6天达到70%,而正常感染组在感染后第6天死亡率只有30%;(2)与正常感染组相比,在每一检测点,VE处理组小鼠脾脏DCs亚群表达水平显著降低;同时,F4/80+巨噬细胞数量明显低于对照组,在感染后第5天,VE处理组小鼠脾脏T细胞活化水平显著降低.结论:在P.y17XL感染早期,VE预处理可通过抑制DCs的成熟和分化,从而加剧P.y17XL感染BALB/c小鼠的感染进程.
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左旋精氨酸通过上调Th1应答介导抗疟保护性免疫
目的 探讨左旋精氨酸(L-Arginine,L-Arg)对致死型约氏疟原虫(Plasmodium yoelii 17XL,P.y17XL)感染BALB/c小鼠Th1免疫应答的调节效应.方法 于P.y17XL感染前7天,连续每日给予BALB/c小鼠L-Arg(1.5 g·kg-1体质量)灌胃预处理;动态观察各组感染小鼠原虫血症水平和生存率;于感染后d 0、d 3和d 5分别提取小鼠脾细胞,流式细胞术检测BALB/c小鼠CD4+CD69+T细胞、F4/80+CD36+巨噬细胞数量;ELISA 法检测脾细胞培养上清中IFN-γ的分泌水平,Griess反应检测脾细胞培养上清中NO含量.结果 与NC组比较,L-Arg能够降低感染小鼠的原虫血症水平,延长生存时间.L-Arg组CD4+CD69+T细胞数量出现有意义的增加,IFN-γ分泌水平明显提高,F4/80+CD36+巨噬细胞数量出现明显升高,NO的分泌也明显增加.结论 在感染早期L-Arg处理可诱导Th1免疫应答的有效建立,明显遏制P.y17XL感染早期红内期疟原虫的感染进程.
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致死型约氏疟原虫感染BALB/c小鼠巨噬细胞的作用地位研究
目的 固有免疫在疟疾急性期感染中的保护性作用地位有待深入研究.本研究旨在探讨巨噬细胞在致死型约氏疟原虫(Plasmodium yoelii 17XL,P.yoelii 17XL)感染中的作用地位.方法 雌性BALB/c小鼠在感染-2、0d腹腔注射氯磷酸脂质体(clodronate liposomes,300μL/只/次),建立巨噬细胞消除模型.对照组小鼠在同时点注射同体积PBS脂质体.随后,小鼠腹腔注射1×106P.y 17XL寄生的红细胞.计数原虫血症和观察生存率.ELISA法检测脾培养上清IFN-γ和IL-10水平,Griess法检测NO(NO-2)水平.脾细胞流式细胞术(FACS)染色,计数F4/80+巨噬细胞数量.结果 与对照组相比,巨噬细胞消除组原虫血症峰值提前出现,较对照组死亡时间提前.在感染0、3、5d,巨噬细胞消除组脾巨噬细胞占脾细胞百分含量和绝对值均明显降低.脾培养上清中IFN γ、IL- 10和NO分泌水平明显下降.巨噬细胞消除后加速P.y 17XL感染BALB/c小鼠的感染进程且明显影响疟疾感染的终结局.结论 巨噬细胞在P.y 17XL感染BALB/c小鼠中发挥重要的免疫保护作用.
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脂多糖对约氏疟原虫感染DBA/2小鼠感染早期的免疫调节作用
目的 本文主要探讨脂多糖(LPS)在致死型约氏疟原虫(Plasmodium yoelii 17×L,Py17×L)感染早期的调节作用.方法 6～8 w、雌性DBA/2小鼠,随机分为实验组和对照组,经腹腔接种1×106 Py17XL寄生的红细胞.实验组于感染后d2静脉给予LPS(25 μg/只).动态观察两组小鼠的原虫血症水平,小鼠脾脏树突亚群及其表面TLR4和活化T细胞的表达水平.结果 (1)两组小鼠于感染后约d15均自愈,LPS处理组小鼠的原虫血症水平在感染后d5-8显著低于对照组；(2)与对照组相比,在感染后d3和d5,LPS处理组小鼠脾脏DCs亚群表达水平显著升高,在感染后d3,TLR4表达水平显著升高.在感染后d5,LPS处理组小鼠脾脏细胞培养初始活化T表达水平显著升高.结论在Py17×L感染早期,LPS可通过激活TLR4强化DC成熟进一步强化Th1免疫应答反应,降低原虫血症,这将为疫苗的开发提供新的靶点.
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香菇多糖对约氏疟原虫感染BALB/c小鼠Th1型应答的调节作用
目的 探讨香菇多糖(Lentinan, Lent)对致死型约氏疟原虫(Plasmodium yoelii 17XL, Py17XL)感染BALB/c小鼠Th1型细胞免疫应答的调节效应.方法 对Py17XL感染的BALB/c小鼠进行不同时间点的Lent预处理,动态观察用药后各组感染小鼠原虫血症水平和生存率;于感染后第0d、1d、3d和5d分别提取小鼠脾细胞,ELISA法检测脾细胞培养上清中IL-12、IFN-γ的分泌水平,Griess反应检测脾细胞培养上清中一氧化氮(NO)含量.结果 与药物未处理组相比,感染前15d 1mg/kg Lent用药组显著降低感染小鼠的原虫血症水平,提高生存率;明显增强Th1型免疫应答中关键细胞因子IL-12 、IFN-γ的分泌水平,并提高NO含量.结论 Lent预处理能够有效激发Py17XL感染的BALB/c小鼠Th1型细胞免疫应答的建立,提示调控免疫应答对于致死型约氏疟原虫感染早期免疫防御的重要性.
