您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
人钠/二羧基转运蛋白2文献资料
-
人钠/二羧基转运蛋白2融合蛋白载体的构建及其原核表达
目的:观测和鉴定人钠/二羧基转运蛋白 2(hSDCT2)在大肠杆菌中的表达,并分离、纯化其蛋白产物.方法:应用DNA重组技术,构建重组表达质粒 pGEX-hSDCT2;IPTG 诱导其表达.采用谷胱甘肽偶联的 Sepharose 4B 亲和层析纯化GST-hSDCT2,经 Factor Xa 酶切和二次亲和层析后,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western Blotting 进行鉴定.结果:成功构建 hSDCT2 基因融合蛋白载体,SDS-PAGE及 Western Blotting 显示 GST-hSDCT2 融合蛋白表达于原核细胞,蛋白产量约占菌体总蛋白量的 25%.经酶切及二次纯化后,获得纯化的 hSDCT2 蛋白.结论:人钠/二羧基转运蛋白 2 可在大肠杆菌中稳定表达.
关键词： 人钠/二羧基转运蛋白2 基因融合 肾
