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融合蛋白IVT文献资料
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融合蛋白IVT表达纯化及生物学活性检测
目的 克隆、表达和纯化融合蛋白IVT,并检测其生物学活性.方法 采用基因工程手段将具有免疫功能、抗血管生成功能和诱导肿瘤细胞凋亡功能的3个基因片段进行融合构建了融合基因IVT.将其插入pPIC9表达质粒中,转化至毕赤酵母GS115(his4),筛选出的表达株经甲醇诱导,表达了重组融合蛋白IVT,并得以纯化.采用MTT法观察IVT对CTLL-2细胞、HUVEC和NCI-H446细胞增殖的影响;通过Transwell实验观察IVT对HUVEC迁移的影响;采用Hoechst染色检测IVT对NCI-H446细胞凋亡的影响.结果 IVT能促进CTLL-2细胞增殖、抑制HUVEC和NCI-H446细胞生长、降低HUVEC细胞迁移能力以及诱导NCI-H446细胞凋亡.结论 IVT具有多种生物学活性,为开发多功能的新型融合蛋白打下了基础.
