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白介素(IL)-32在胆道闭锁患儿肝组织中的表达水平及临床意义
目的:研究白介素-32(intedeukin-32,IL-32)在胆道闭锁(biliaryatresia,BA)及胆总管扩张(choledochal cyst,cc)患儿肝脏组织中的表达水平变化,从而探讨白介素(IL)-32在胆道闭锁患儿肝脏组织中的临床意义.方法:选取我院2012年2月～2015年10月期间收治的胆道闭锁患儿35例及未发生胆管炎的胆管扩张症患儿14例为研究对象,划分胆道闭锁患儿为观察组(BA)及胆管扩张患儿为对照组(CC).采用荧光实时定量(Real-time quantitative PCR,qPCR)和蛋白质印迹(westernblot,WB)方法分别检测胆道闭锁组(BA)和胆总管扩张组(CC)两组中肝脏组织内白介素(IL)-32的表达水平,并对两组间IL-32的表达水平进行比较分析,同时对BA组中白介素(IL)-32表达情况与肝功能相关的血清指标进行相关性分析.结果:BA组中IL-32 mRNA及蛋白表达水平明显高于CC组(P＜ 0.05);BA组IL-32与γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyltranspeptidase,γ-GT)、谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(Aspartate transaminase,AST)肝功能相关指标表达水平进行相关性研究表明:IL-32与γ-GT、ALT、AST之间呈正性相关的关系(P＜0.05).结论:肝功能相关指标如γ-GT、ALT、AST的检测值随着IL-32表达水平的增高而增高,说明了胆道闭锁患儿肝组织IL-32与其肝功呈正相关的特点,对预测胆道闭锁患儿肝功能具有临床参考意义.
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急性白血病IL-32水平动态变化与病情发展的关系
目的:检测急性白血病(AL)患者的白介素32(IL-32)的表达,探讨其表达的临床意义.方法:应用酶联免疫吸附法和实时荧光定量PCR分别检测82例AL患者和30例健康人血清中IL-32的浓度及其mRNA的表达.结果:与健康人群相比,AL组及其两个分型组(ANLL和ALL)的外周血清IL-32蛋白水平及IL-32 mRNA表达水平均显著提高(P＜0.05).ANLL和ALL处于初诊、PR和复发期的患者的IL-32蛋白水平及IL-32 mRNA表达水平明显高于健康人群(P＜0.05),并且其复发期组患者的IL-32蛋白水平及IL-32 mRNA表达水平显著高于其他分期组患者(P＜0.05);而在ANLL和ALL患者中处于CR期患者的IL-32蛋白水平及IL-32 mRNA表达水平与健康人群相比无显著性差异(P＞0.05).结论:急性白血病患者外周血中IL-32与其自身的病情发展有密切联系,检测患者体内IL-32的动态变化,有助于了解疾病的进展,因而IL-32水平可作为监测急性白血病的疗效指标.
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IL-32和IL-18在人膝骨关节炎发病中的表达及意义
目的 探讨IL-32和IL-18在骨关节炎发病中的表达及相关性,以了解IL-32在骨关节炎发病中的意义.方法 研究对象包括膝骨关节炎患者62例,正常人31例;应用酶联免疫吸附测定IL-32和IL-18在骨关节炎患者关节滑液中的表达,分析IL-32和IL-18在膝骨关节炎关节滑液中的相关性.结果 IL-32和IL-18两个指标的试验组与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01),表示IL-32和IL-18两个指标在骨关节炎关节滑液中表达与正常人的关节滑液比较异常增高.IL-32和IL-18的表达水平作Spearman相关分析,相关系数分别为r=0.908(P＜0.01),呈正相关.结论 骨关节炎的发病过程中可能与IL-32密切相关,IL-32和IL-18呈正相关.
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IFN-γ、IL-32、IL-1β在慢性阻塞性肺疾病中的临床意义
目的 探讨干扰素-γ、白介素-32和白细胞介素-1β在慢性阵塞性肺疾病患者血清中的表达及临床意义.方法 ELISA法检测健康对照组、COPD稳定组、AECOPD组血清中IFN-γ、IL-32和IL-1β的浓度.结果 AECOPD组的IFN-γ、IL-32和IL-1β的浓度水平显芳高于健康对照组、COPD稳定组(P<0.01).COPD稳定组较健康对照组的IL-32、IL-1β的浓度水平均显著升高(P均<0.05);COPD稳定组较健康对照组的IFN-γ水平无显著性差异(P>0.05).结论 IFN-γ、IL-1β、IL-32反馈环可能参与了COPD患者急性加重的炎症反应.
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乙型肝炎肝硬化患者外周血IFN-γ、IL-32和IL-6的临床相关性
目的：探讨乙肝肝硬化患者外周血IFN‐γ、IL‐32和IL‐6水平的临床相关性。方法收集42例乙型肝炎肝硬化患者和50例健康对照者空腹血清，采用 ELISA法检测血清IFN‐γ、IL‐32和IL‐6水平；采用荧光定量PCR法检测血清HBV DNA载量；采用全自动生化分析仪检测血清肝功能水平。结果健康对照者血清IFN‐γ、IL‐32和IL‐6水平分别为（14．41±3．71）、（182．24±72．22）、（1．62±0．63） ng／m L ，乙肝肝硬化患者分别为（182．12±41．37）、（1218．21±215．08）、（37．70±9．77） ng／mL。IFN‐γ水平与ALb水平呈负相关（r＝－0．342，P＜0．05），与 HBV DNA水平呈正相关（r＝0．319，P＜0．05）；IL‐6水平与ALT水平呈负相关（r＝－0．314，P＜0．05）。结论 IFN‐γ、IL‐32和IL‐6在慢性 HBV感染过程中可能起重要作用，可作为评估慢性乙型肝炎病情严重程度的重要指标。
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类风湿关节炎患者IL-32和TNFα的检测及其意义
目的 检测类风湿关节炎患者血清和膝关节滑液(SF)中细胞因子白介素-32(IL-32)和炎症介质TNFα含量,探讨IL-32和TNFα在类风湿关节炎(RA)发病中的作用.方法 提取30例类风湿关节炎患者(RA组)的血清和关节滑液,l0例健康人的(对照组)膝关节液,用ELISA酶联免疫吸附法检测IL-32和TNFα含量,并对IL-32和TNFα两指标作线性相关与回归分析.结果 RA组血清和膝关节滑液中IL-32和TNFα含量与正常组比较有增高的趋势,差异有统计学意义(P＜0.01).对照组IL-32血清和膝关节滑液浓度值分另别为(28.65±8.51)×10-9g/L和(44.61±6.53)× 10-9g/L,RA组IL-32血清和膝关节滑液浓度值分别为(94.96±9.87)×10-9g/L和(155.86±41.53)×10-9g/L(P均＜0.01).对照组TNFα血清和关节滑液浓度值分别为(103.53±16.92)×10-9g/L和(405.61±33.85)×10-9g/L,RA 组 TNFα血清和膝关节滑液浓度值为(360.96±52.61)×10-9g/L和(846.36±52.13)×10-9g/L(P均＜0.01).线性相关分析表明IL-32与TNFα有较强(对照组的性关系数r未超过0.5不能说有较强相关性)正相关关系(对照组血清r=0.46,P＜0.O1,关节滑液r=O.43,P＜0.01;RA组血清r=0.59,P＜0.01,关节滑液,r=0.64,P＜0.01).结论 IL-32与TNFα可能参与了类风湿关节炎的发病,IL-32的增高可能引起TNFα含量的增高,从而在RA的发病机制中发挥重要作用.
关键词： 白介素-32 肿瘤坏死因子TNFα 细胞因子 类风湿关节炎 关节滑液 -
IL-32在慢性鼻窦炎组织中的表达及机理研究
目的 探讨白介素-32(interleukin-32,IL-32)在慢性鼻窦炎组织中的表达及其致病机理.方法 收集40例慢性鼻窦炎患者,同期选取20例行鼻部手术患者的正常组织作为对照者,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测两组鼻组织中IL-32蛋白;采取即用型EnVisionTM Super/HRP检测试剂盒检测两组鼻黏膜组织中CD3+和CD68+表达.结果 慢性鼻窦炎鼻黏膜组织中IL-32表达高于对照组(P＜0.01),慢性鼻窦炎鼻黏膜组织中CD3+细胞计数(55.36±23.53)个/mm2显著高于正常对照组(28.27±11.43)个/mm2 (P ＜0.01);慢性鼻窦炎鼻黏膜组织中CD68+细胞计数(7.65±2.27)个/mm2高于对照组(5.98±2.10)个/mm2(t=2.741,P＜0.01).且慢性鼻窦炎鼻黏膜组织中IL-32与CD3+和CD68+表达呈正相关(P＜0.05).结论 IL-32可能通过招募炎症细胞,参与慢性鼻窦炎的发病.
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IL-32在神经胶质瘤中的表达及调节机制研究
目的 探讨白细胞介素(IL)-32在神经胶质瘤中的表达及调节机制. 方法 RT-PCR、Western blotting检测体外培养3d的神经胶质瘤细胞株CHG-5、U251 IL-32 mRNA和蛋白的表达;应用10 ng/mL IL-1β、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17、肿瘤坏死因子(TNF)-α、TNF-β、干扰素(IFN)-γ作用U251细胞24 h后RT-PCR检测细胞IL-32 mRNA表达的变化;RT-PCR检测不同浓度IL-1β、TNF-α、IFN-γ作用U251细胞不同时间后IL-32 mRNA表达的变化. 结果 U251细胞IL-32 mRNA表达水平高于CHG-5细胞,IL-32蛋白表达水平(0.95±0.42)高于CHG-5细胞(0.28±0.13),差异均有统计学意义(P＜0.05); IL-1β、TNF-α、IFN-γ作用U251细胞24 h后IL-32 mRNA表达量增加,差异有统计学意义(P＜0.05),且IL-32 mRNA的表达量对IL-1β、TNF-α、IFN-γ刺激的浓度和时间有依赖性. 结论 IL-32在神经胶质瘤中高表达,IL-1β、TNF-α、IFN-γ对IL-32 mRNA的表达具有调节作用,且存在时间与剂量依赖性.
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HBV-ACLF患者外周血和肝脏IL-32的表达水平与肝损伤的相关性
目的 探讨HBV相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者外周血和肝脏IL-32的表达水平与肝损伤的相关性.方法 选择需肝移植手术的HBV-ACLF患者及轻度慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者各20例.收集HBV-ACLF患者和CHB患者外周血血清,HBV-ACLF患者手术中切除的肝组织及轻度CHB患者肝穿刺标本,另收集5例手术切除肝血管瘤患者的血液标本及远离肿瘤的正常肝组织作为正常对照.分别利用ELISA和免疫组织化学染色检测轻度CHB患者和HBV-ACLF患者外周血血清及肝组织中IL-32的水平.分析外周血和肝脏IL-32的表达水平及与肝损伤程度(总胆红素水平)的相关性.结果 HBV-ACLF患者外周血IL-32水平高于轻度CHB患者及正常对照者(P均＜0.001);HBV-ACLF患者肝组织中IL-32的水平亦高于轻度CHB患者及正常对照者(P均＜0.001).HBV-ACLF患者外周血和肝脏IL-32水平与血清总胆红素水平均呈正相关(rs分别为0.686和0.544,P均＜0.05).结论 促炎细胞因子IL-32高表达可能是导致HBV-ACLF免疫性肝损伤加剧、肝细胞大量凋亡和坏死的重要因素.
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白介素-32及其与炎症性疾病的关系研究进展
白介素-32是新近发现的一种前炎症反应细胞因子,有6种剪接变异体形式,主要作用是诱导TNFα、IL-1β、IL-6和趋化因子的产生,参与了固有性和适应性免疫应答.研究发现IL-32及其受体与多种自身免疫性炎症性疾病的发生、发展有密切联系,本文就此方面做了总结.
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噬菌体展示技术筛选与白介素-32相互作用的蛋白
目的 利用T7噬菌体展示技术筛选与白介素-32(interleukin-32,IL-32)相互作用的蛋白.方法 构建IL-32α的原核表达重组质粒,表达并纯化重组IL-32α蛋白(recombinant IL-32α,rIL-32α);以纯化后的rIL-32α作为靶蛋白,应用T7噬菌体展示技术对人肝细胞cDNA文库进行筛选;对筛选到的阳性克隆进行DNA测序及计算机辅助分析;利用哺乳动物双杂交实验和免疫共沉淀实验对筛选到的阳性克隆进行验证.结果 成功表达并亲和纯化了rIL-32α蛋白;经过5轮筛选,投入和产出的噬菌体滴度比值达到稳定;同源性分析初步确定9个与IL-32α蛋白相互作用的蛋白;进一步实验证实IL-32α与这9个蛋白片段能发生相互作用.结论 利用T7噬菌体展示技术成功筛选到9个与IL-32α相互作用的蛋白,我们的发现为深入揭示IL-32的生物学功能奠定了研究基础.
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1个新的白介素-32剪接异构体的克隆与表达
目的 对白介素-32 (interleukin-32,IL-32)的不同剪接异构体进行克隆及表达.方法 设计保守引物,以Jurkat细胞的cDNA为模板进行PCR扩增,克隆IL-32不同剪接异构体;DNA测序扩增产物,计算机辅助分析IL-32基因序列特征；构建IL-32原核及真核表达重组质粒,并利用SDS-PAGE和Western blot检测其表达情况.结果 克隆得到已知的IL-32的6个剪接异构体(α、β、γ、δ、ε、ξ),还克隆得到1个新的IL-32剪接异构体,将其命名为IL-32η,Genbank登录号JN546102.IL-32η编码区长度为336 bp,编码的蛋白含111个氨基酸残基,其理论相对分子质量为12 560.IL-32η原核表达产物主要以可溶形式位于宿主菌的周质腔.亲和纯化了重组IL-32η,利用重组IL-32η制备了兔多克隆抗体,该抗体能够识别IL-32全部的7个剪接异构体.结论 克隆得到1个新的IL-32剪接异构体IL-32η,它的发现将为全面理解IL-32的功能提供新思路.
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体外冲击波对膝骨关节炎IL-32、DKK-1水平的影响
目的 观察体外冲击波联合玻璃酸钠治疗膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)的临床疗效及对关节液中白介素-32(interleukin-32,IL-32)、Dickopff相关蛋白1(Dickopff-1,DKK-1)水平的影响.方法 将50例KOA患者随机分为治疗组和对照组,各25例.治疗组男16例,女9例;平均年龄(57.4±10.1)岁,病程(3.1±2.3)年.对照组男18例,女7例;平均年龄(58.3±10.2)岁,病程(3.3±1.7)年.对照组给予关节腔内注射玻璃酸钠,每周1次,共治疗5周.治疗组在对照组基础上加用体外冲击波治疗,每周1次,共治疗5周.在干预前和干预第5周采用活动时疼痛视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)、骨关节炎严重程度评分法(lequesne指数)和美国西部Ontario与McMaster大学骨关节炎指数(western Ontario and McMaster University osteoarthritis index,WOMAC)评分评价两组患者疗效,检测并比较两组患者关节液中IL-32、DKK-1水平的变化.结果 两组患者治疗后VAS评分 、Lequesne指数评分 、WOMAC评分均明显降低(P<0.05或0.01),治疗后治疗组各评分明显低于对照组(P<0.05或0.01).治疗后两组患者关节液中IL-32水平比治疗前显著下降(P<0.01),治疗组DKK-1水平较治疗前增高(P<0.01);治疗后治疗组关节液中IL-32水平显著低于对照组(P<0.05),而治疗后治疗组DKK-1水平则显著高于对照组(P<0.05).结论体外冲击波联合玻璃酸钠治疗KOA疗效显著,可明显减轻关节疼痛,改善膝关节活动功能,其作用机制可能与降低关节液中IL-32水平 、提高DKK-1水平有关.
关键词： 膝骨关节炎 体外冲击波 玻璃酸钠 白介素-32 Dickopff相关蛋白1 -
白介素-32与帕金森病患者非运动症状的相关性研究
目的 探讨帕金森病(Parkinson's disease,PD)患者血清白介素-32(interleukin-32,IL-32)水平与非运动症状之间的相关性.方法 采用横断面调查研究,选取2014年10月-2016年10月河南科技大学第一附属医院74例门诊、住院PD患者及60名健康体检者,检测外周血清中IL-32的水平,采用PD非运动症状评价量表(non-motor symptom score,NMSS)对患者的非运动症状进行评分统计;分析血清IL-32水平与患者非运动症状及NMSS各项的相关性.结果 PD患者血清IL-32水平高于健康体检者(P=0.014);PD患者血清IL-32水平与NMSS评分之间存在显著正相关(r=0.668,P=0.000);NMSS各项分析结果显示,PD患者血清IL-32水平与患者的情绪与认知障碍(r=0.766、P=0.000)、注意力与记忆力障碍(r=0.687、P=0.000)均存在正相关.结论 PD患者血清IL-32高于正常水平,可能是影响PD患者的情绪与认知、注意力与记忆力的因素,降低血清IL-32水平也许是治疗PD患者非运动症状新的靶点.
