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poly(A)加尾酶文献资料
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Poly（A）加尾-RNase H消化-RT-PCR法分析应激诱导生成5′端tRNA半分子
目的：建立一种简便、快速检测应激诱导细胞生成的5′端转移RNA（ tRNA）半分子的方法。方法提取应激诱导细胞RNA，用poly（ A）加尾酶在RNA分子3′端加尾后，加入与待测tRNA的3′端部分序列互补的简并DNA探针杂交，经RNase H消化与DNA探针互补的tRNA序列，再由oligo（ dT） n锚定引物进行逆转录获得互补DNA（ cDNA），以5′端tRNA半分子和锚定引物的序列为PCR反应的上下游引物，PCR扩增检测5′端tRNA半分子。结果经poly（ A）加尾-RNaseH消化-RT-PCR-电泳等步骤，可以实现对5′端tRNA半分子的检测分析。结论 poly （ A）加尾-RNaseH消化-RT-PCR法的建立实现了5′端tRNA半分子的简便、快速检测分析，为tRNA半分子生物学功能研究和检测分析提供了工具。
