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全反式维甲酸对急性白血病骨髓基质细胞GJIC功能的影响
目的 观察在全反式维甲酸(ATRA)作用下急性白血病骨髓基质细胞间连接蛋白43(Cx43)表达的变化及通讯功能的改变.方法 体外培养急性白血病骨髓基质细胞,传代后加入ATRA(1×10-5mol/L),采用细胞免疫化学及流式细胞术检测加药前后Cx43表达的变化;采用细胞划痕染料传输技术比较二者间隙连接细胞间通讯(GJIC)功能的差异.结果 急性白血病骨髓基质细胞加药前后,细胞免疫化学方法检测Cx43表达的阳性率分别为47.2%±2.04%和54.5%±5.66%,流式细胞术检测Cx43的含量为38.75%±23.95%和49.5%±5.46%;加药后染料可传输至4～5列细胞,明显高于加药前(P＜0.01).结论 加入ATRA后,急性白血病骨髓基质细胞间通讯功能较加药前明显增强.
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雌二醇及雌酮对人子宫内膜细胞GJIC及连接蛋白的影响
[目的]探讨雌二醇(E2)及雌酮(E1)对体外培养的人子宫内膜腺上皮细胞及间质细胞间隙连接细胞间通讯(GJIC)及连接蛋白(Cx)43、32表达的影响.[方法]采用划痕染料标记示踪技术及激光共聚焦显微镜扫描技术(LSCM),观察E2及E1对原代培养的20例人子宫内膜腺上皮细胞及间质细胞GJIC的影响,采用激光共聚焦显微镜扫描技术,观察E2及E1对Cx 43、Cx 32表达的影响.[结果]5×10-5 mol/L雌二醇作用48 h后间质细胞及腺上皮细胞GJIC功能没有明显变化(P＞0.05),2.5×10-5 mol/L雌酮作用间质及腺上皮细胞48 h后,细胞GJIC功能有所下降(P＜0.01),同种Cx腺上皮细胞表达较间质细胞强(P＜ 0.05),5×10-5 mol/L E2、2.5×10-5 mol/L E1对两种细胞Cx的表达没有影响(P＞0.05).[结论]E1抑制细胞GJIC功能,提示其在子宫内膜增殖性病变的阶段扮演重要角色；E1及E2均未影响子宫内膜细胞Cx43、Cx32的表达,提示Cx表达量不能完全反映GJIC功能.
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左旋炔诺孕酮对人子宫内膜细胞体外增殖及细胞间通讯的影响
[目的]探讨左旋炔诺孕酮对体外培养的人子宫内膜腺上皮细胞及间质细胞增殖、间隙连接细胞间通讯(gap junction intercellular communication,GJIC)及连接蛋白(connexin,Cx)43、32表达的影响.[方法]采用MTT法观察LNG对人子宫内膜细胞的增殖调节作用,采用划痕染料标记示踪技术,观察左旋炔诺酮(levonorgestrel,LNG)对原代培养的人子宫内膜腺上皮细胞及间质细胞GJIC的影响,采用激光共聚焦显微镜扫描技术,观察LNG对Cx 43、Cx 32表达的影响.[结果]LNG浓度为5×10-5 mol/L时,对子宫内膜间质和上皮细胞均有抑制生长作用(P＜0.05),体外培养的人子宫内膜间质细胞的GJIC功能较腺上皮细胞强(P＜0.05),LNG可显著提高人子宫内膜腺上皮细胞及间质细胞间荧光黄染料的扩散(P＜0.05);同种Cx腺上皮细胞表达较间质细胞强(P＜0.05),LNG对两种细胞Cx的表达没有影响(P＞0.05).[结论]LNG可抑制人子宫内膜腺上皮细胞及间质细胞体外增殖,显著促进细胞GJIC功能,提示其在逆转子宫内膜增殖性病变的阶段扮演重要角色;LNG未影响子宫内膜细胞Cx43、Cx32的表达,提示Cx表达量不能完全反映GJIC功能.
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Cx43介导的GJIC功能在白血病的研究进展
间隙连接细胞间通讯(GJIC)是相邻细胞间普遍存在的直接通讯方式,参与细胞间的物质交换和信号的传递.GJIC是1种高效、快速的传递方式,对细胞的新陈代谢、内环境的稳定及许多生理过程(如增殖、分化、凋亡等)发挥着重要的调节作用.GJIC的物质基础是相邻细胞膜上连接子耦联形成的通讯通道,每个连接子含6个连接蛋白(Connexon,Cx).Cx是1个较保守的蛋白家族,至今在人类中已经发现21种,依据相对分子质量命名,如Cx26、Cx32、Cx43等.
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EMs异位及在位内膜间质细胞Cx43的表达及GJIC功能的体外研究
目的:研究子宫内膜异位症(EMs)的异位与在位内膜间质细胞中Cx43的表达及间隙连接细胞间通讯(GJIC)功能,探讨间质细胞GJIC功能异常对EMs发病的影响.方法:取24例卵巢处子宫内膜异位灶、41例EMs在位内膜以及30例正常子宫内膜,分离出间质细胞,加入雌、孕激素培养,建立体外间质细胞培养模型.利用激光共聚焦显微镜(LSCM)分别检测三组间质细胞的Cx43表达及GJIC功能.结果:间质细胞成功培养率分别为:异位内膜组45.8%(11/24)、EMs在位内膜组92.7%(38/41)、对照组93.3%(28/30),异位内膜间质细胞纯度为95%,在位内膜间质细胞纯度达98%.EMs异位内膜间质细胞中Cx43表达水平及GJIC功能明显比其他两组低,正常对照组的Cx43表达水平及GJIC功能高,且差异均有显著性(P＜0.01).结论:(1)同时建立EMs异位内膜、在位内膜及正常内膜间质细胞的体外模型,有助于研究EMs的发病机制;(2)间质细胞中Cx43蛋白表达下调及其GJIC功能异常与EMs发生有关,调节Cx43表达或GJIC功能可能是潜在的治疗策略.
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异位和正常子宫内膜间质细胞对上皮细胞间隙连接细胞间通讯的影响
目的 研究体外异位和正常子宫内膜间质细胞对内膜上皮细胞间隙连接细胞间通讯(gap junctional intercellular communication, GJIC)功能的不同影响.方法 取24例卵巢处子宫内膜异位灶以及10例正常子宫内膜,分离、纯化上皮细胞和间质细胞,建立体外上皮细胞单独培养、上皮细胞与间质细胞共培养模型.在激光共聚焦显微镜下采用荧光漂白后恢复技术分别检测各组上皮细胞的GJIC功能.结果 ①异位内膜上皮、间质细胞纯度分别为92%、95%,对照组内膜上皮、间质细胞纯度分别为95%、98%;②单独培养的异位内膜上皮细胞与单独培养的正常内膜上皮细胞的GJIC功能无显著性差异(P＞0.05);③与正常间质细胞共培养后,上皮细胞中GJIC功能明显上调,而与异位内膜间质细胞共培养的上皮细胞中GJIC功能未见明显变化.结论 异位间质细胞丧失了调节上皮细胞GJIC的能力,这种调节能力的异常可能与子宫内膜异位症发生有关.
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间隙连接细胞间通讯在造血调控中的作用
间隙连接是相邻细胞间允许细胞间离子,代谢产物和其他信号分子交换的通道.这些细胞间通道由独特的结构单位间隙连接蛋白(Cx)组成.在脊椎动物中,Cx由多基因家族编码而成至少20种成员,在造血组织中主要是Cx43[1].Cx43在很多造血器官中均有表达,但主要表达在骨髓、胸腺、脾脏和其他淋巴组织.胸腺和骨髓上的基质细胞中Cx43蛋白组装成有功能的间隙连接已经得到证实[2].
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全反式维甲酸上调异位子宫内膜间质细胞GJIC功能的机制
目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对人异位子宫内膜间质细胞间隙连接细胞间通讯(GJIC)功能的调节作用及其机制.方法:取人子宫内膜异位症(EMs)患者的间质细胞,采用0.1,1,10 μmol/L ATRA于24,48,72,96和120 h分别进行处理,同时设置空白对照组.采用激光共聚焦显微镜检测异位内膜间质细胞的GJIC功能,并检测与GJIc功能密切相关的Cx43,Cx26和Cx32的基因及蛋白表达.结果:经ATRA处理后,1 μmol/L与10 μmol/L处理组的异位内膜间质细胞荧光恢复功能明显增强;0.1 μmol/L处理组的异位内膜间质细胞荧光恢复功能无明显变化.未经ATRA处理的异位内膜间质细胞中无Cx43,Cx26和Cx32的mRNA及蛋白表达;经1,10μmol/LATRA处理后,异位内膜间质细胞中检测到Cx43 mRNA和蛋白表达,但未见Cx26和Cx32的mRNA及蛋白表达.间质细胞的GJIC功能与去磷酸化Cx43蛋白的表达有关.结论:ATRA能选择性的诱导Cx43基因及其去磷酸化蛋白的表达,从而上调异位内膜间质细胞的GJIC功能;ATRA酸可能是治疗EMs的潜在药物.
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全反式维甲酸对异位子宫内膜间质细胞GJIC功能的调节作用
0 引言 间隙连接细胞间通讯(gap junctional intercellular communication, GJIC)是多细胞生物体内普遍的通讯方式.
