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诱导家蝇幼虫抗菌蛋白的提取及动力学研究
目的比较两种方法提取家蝇幼虫抗菌蛋白抑菌活性,并观察两种诱导源所诱导家蝇幼虫血淋巴中抗菌蛋白产生的动力学变化.方法用金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌诱导家蝇幼虫,在诱导后12,24,36,48,60 h收集家蝇幼虫,80℃热水处死,分别用血淋巴、组织匀浆提取抗菌蛋白后进行抗菌活性的测定.结果用组织匀浆提取的抗菌蛋白抑菌效果明显好于血淋巴;金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌诱导家蝇幼虫产生抗菌物质达大活性时间分别为诱导后48,36 h.结论用组织匀浆提取家蝇幼虫抗菌蛋白是一种较好的方法;诱导后36～48 h的抗菌蛋白活性大.
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没食子酸抑菌活性分析
目的 通过测定没食子酸的体外抑菌活性,为其相关抑菌药物的研制提供科学依据.方法 采用纸片扩散法测定没食子酸对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌、蜡样芽孢杆菌、白色念珠菌的抑制作用及其小抑菌浓度.结果 没食子酸对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌抑菌环直径依次为9.00、7.50、8.50、9.45 mm,阳性对照组中青霉素对金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌抑菌环依次为32.00、18.00 mm;头孢他啶对大肠埃希菌、肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌的抑菌环依次为36.00、39.50、37.00m m;两性霉素对白色念球菌的抑菌环直径为15.00mm,阳性对照效果良好,表明实验结果比较可靠,没食子酸对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌均有较好的抑制作用;经过初次筛选、二次筛选,得到没食子酸对以上4个菌种的小抑菌浓度分别为1、5、＜0.5、10 mg/mL,其中对肠炎沙门菌抑菌效果好.结论 没食子酸对会黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌均有较好的抑制作用,具有开发相关抑菌药物的价值.
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甲壳胺体外抑菌活性试验研究
甲壳胺(chitosan)是由虾蟹壳中提取的一种天然糖类物质,有良好的生物相容性和可降解性,有多种药理作用和保健作用[1].可做为特殊营养食品,也可做为化妆品的保湿剂、定型剂和防腐剂.本文就甲壳胺的体外抑菌活性进行了试验研究.
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抑菌晕法筛选抗菌织物试验的评价
随着科学技术的发展,人民生活水平的提高,纺织品已从满足人们御寒遮体这一主要功能逐步转化,抗菌织物就是一新的功能织物.由于该类产品种类繁多,使得其抗菌性能检测变得十分复杂.为建立简便、快速、准确的抗菌织物定性筛选实验方法,我们对武汉市市售的102件不同种类抗菌织物用抑菌晕法进行了抑菌活性的检测.结果报告如下.
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延胡索提取物抑菌活性的初步研究
应用纸片法对延胡索提取物的抑菌作用进行研究.结果表明:乙醇提取抑菌效果优于水提取,以正丁醇作萃取液抑菌效果明显;薄层层析结果表明有抑菌活性的物质Rf值为0.80.所得提取物对金黄色葡萄球菌抑制效果好,低抑菌浓度为2mg/mL,大肠杆菌次之,绿脓杆菌弱.
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番石榴叶总黄酮提取工艺及其抑菌活性研究
目的:优化番石榴叶总黄酮提取工艺,并筛选抑菌活性部位.方法:乙醇回流提取番石榴叶黄酮,紫外分光光度法测定黄酮含量,正交试验优化提取工艺;采用纸片扩散法对番石榴叶醇提物分别经石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取的部位进行抑菌实验.结果:佳工艺:80％乙醇,料液比=1∶25(g:mL),提取3次,每次1h,总黄酮提取率为46.71 mg·g-1.对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌抑菌活性大小为:乙酸乙酯萃取部位＞正丁醇萃取部位＞萃余相＞60％乙醇总提物;对枯草芽孢杆菌抑菌活性大小为:正丁醇萃取部位＞乙酸乙酯萃取部位＞萃余相＞60％乙醇总提物.结论:番石榴叶提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌均可产生抑菌效果.乙酸乙酯和正丁醇萃取部位抑菌效果较好.
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大黄提取物制备纳米银抑菌材料形态及抑菌性能研究
目的:探究大黄提取物制备纳米银抑菌材料的形态及其抑菌性能研究.方法:以大黄提取物为还原剂,使用生物还原法制备纳米银颗粒,分别通过紫外可见光光谱扫描、动态光散射及抑菌杀菌试验,观察不同制备方法下纳米银颗粒形态、稳定性及抑菌杀菌能力.结果:空白纳米银及供试品特征吸收峰为425 nm,在500～ 700nm波长范围内,无特征吸收峰出现,两种方法制备纳米银颗粒均未出现团聚体.大黄提取物制备的纳米银颗粒粒径为40.3 nm,较空白纳米银颗粒(52.1 nm)小.伴随加速实验时间延长,供试品及空白纳米银颗粒大小均呈现增大趋势.60℃加速35 d后空白纳米银颗粒粒径为392.7 nm;供试品粒径为68.1 nm,增幅小于空白对照组,表明大黄提取物制备纳米银颗粒有助于增加纳米银颗粒稳定性,避免纳米银颗粒过度聚集.大黄提取物能大大提高了纳米银的抗菌能力,大肠埃希菌小抑菌浓度为50 μg/mL,较空白纳米银颗粒抑菌活性增加了10倍;而金黄色葡萄球菌小抑菌浓度只需50 μg/mL,较空白纳米银颗粒抑菌活性增加了30倍.对上述两种细菌,小杀菌浓度分别提高了4倍及20倍.结论:大黄提取物不仅能够提高纳米银颗粒的稳定性,还能增强纳米银颗粒抑菌活性.
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茵芋鲜叶挥发油成分及抑菌活性研究
目的:研究茵芋Skimmia reevesiana Fort.鲜叶挥发油化学成分及其抑菌活性.方法:采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术分析茵芋鲜叶挥发油的化学成分;采用滤纸片琼脂扩散法测定其对2种人体病原菌的体外抑菌活性.结果:共鉴定出38种挥发性成分,占精油总量的77.09％.其中主要的化学成分为乙酸香叶酯(23.70％)、匙叶桉油烯醇(9.26％)、氧化石竹烯(7.35％)、2,4-二叔丁基苯酚(5.47％)、δ-杜松醇(4.65％)、β-波旁烯(2.89％)、长叶烯(2.67％).茵芋鲜叶挥发油对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和白色念珠菌(Canidia albicans)均表现出一定的抑菌作用.结论:该研究为茵芋的开发利用提供了实验依据.
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石荠芋总黄酮的大孔树脂吸附纯化及其体外抑菌活性研究
目的:确定石荠芋总黄酮的大孔树脂吸附纯化工艺条件及其体外抑菌活性.方法:采用静态吸附和解吸实验考察不同型号大孔树脂对石荠苧总黄酮的吸附和解吸性能,确定其佳分离纯化条件.采用二倍稀释法,检测石荠芋总黄酮对7种常见致病菌的抑菌效果.结果:HPD300大孔树脂对石荠苧总黄酮的吸附量大,吸附率和回收率也高.在室温下,将浓度为5.55 mg/mL(pH =3.0)的石荠苧总黄酮提取液,以2.0 mL/min速上经预处理后的HPD300大孔树脂柱,吸附后先以80 mL蒸馏水洗脱树脂柱,再用70 mL 60％乙醇(pH=8.0)以2.0 mL/min流速洗脱.此工艺条件下石荠苧总黄酮的回收率达89.12％,纯度为90.77％.纯化所得的石荠苧总黄酮对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、痢疾杆菌具有较强的抑菌作用,其MIC分别为0.31 mg/mL、0.63 mg/mL、0.63 mg/mL.结论:HPD300大孔树脂适用于石荠芋总黄酮的分离纯化.石荠芋总黄酮对金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌具有较强的抑菌作用.
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天然来源枯草芽孢杆菌的抑菌活性研究
目的:研究一种天然来源抑菌剂对常见致病性细菌(金黄色葡萄球菌,蜡状芽孢杆菌,铜绿假单胞菌,大肠杆菌)以及石斛病原真菌(烟草疫霉菌)的抑制作用.方法:从东海沙滩泥土中分离纯化菌株,通过牛津杯法及对峙法筛选对四株致病性细菌和一株石斛病原真菌具有抑制作用的活性菌株;通过观察菌体形态,16SrRNA测序、GenBank比对,对优活性菌株进行鉴定;通过优化菌株培养条件,获得活性物质产生佳发酵条件.结果:从样品中共分离52株菌,6株菌发酵液提取物对病原细菌具有抑制作用,2株对烟草疫霉菌具有拮抗活性.选取活性佳的菌株,通过鉴定,确定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis);其发酵液乙酸乙酯提取物对所述5株指示菌具有生长抑制活性;通过优化,确定该菌佳培养条件为37℃,ISP2培养基,发酵培养96 h.结论:从东海中所分离获得的枯草芽孢杆菌对常见致病细菌具有较强的抑制作用,且对烟草疫霉菌具有抑制作用,可用于筛选石斛病原菌天然抑制剂的研究.
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五倍子对致泻性海洋弧菌体外抗菌活性的实验研究
目的:体外试验五倍子两种提取物对致泻性弧菌的抑制活性.方法:平皿孔穴法.结果:五倍子对所试验的弧菌属的副溶血弧菌、创伤弧菌、溶藻弧菌、拟态弧菌表现出较强的抑制活性.结论:首次证明五倍子对常见引起腹泻的海洋弧菌的抑制活性,为使用五倍子等中药治疗弧菌性腹泻提供了依据.同时弧菌属于常见海洋污损微生物,该发现也为舰船等防污研究提供了参考.
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铜绿假单胞菌抗菌物质对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑菌活性研究
目的 观察铜绿假单胞菌抗菌物质对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的体外抑菌活性.方法 用交叉划线接种方法进行铜绿假单胞菌对32株耐甲氧西林金葡菌的体外抗菌活性的测定.结果 铜绿假单胞菌抗菌物质对MRSA的体外抑菌活性良好,产生色素的菌株的抗菌活性好,15株铜绿假单胞菌中,7株产蓝绿色色素的铜绿假单胞菌,对MRSA的抑制率均达到了100％,平均抑菌带的宽度为37.7 mm.结论 铜绿假单胞菌抗菌物质对32株MRSA具有较强的抗菌活性,无疑对MRSA感染的抗菌药物研制方面开辟了一条新的途径.这是国内的首次研究报道.
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生殖道中具有抑菌活性乳酸菌的分离筛选及其抑菌物质分析
目的 从阴道炎患者的棉拭子样本中分离筛选具有抗菌活性乳酸菌,为研究对细菌性阴道炎具有确实疗效的微生态制剂提供理论与菌种保证.方法 应用纯培养技术及双层平板法从阴道样品中分离筛选具有较好抑菌活性的乳酸菌.通过有机酸排除试验、过氧化氢排除试验和蛋白类抑菌物质排除试验对具有较好抑菌活性菌株的主要抑菌物质分析,并通过PCR反应对是否具有细菌素相关基因进行鉴定.结果 从7个棉拭子样本中共分离得到26株乳酸菌,其中有6株呈现抑菌活性.K4M2、K4M5、K4M6和K4M8菌株的主要抗菌物质为有机酸.而K4M9、K4M10两株植物乳杆菌的主要抗菌物质除有机酸外,尚可以产生细菌素.病原菌拮抗试验结果表明,这两株菌株的混合培养上清对具有较好的抑菌效果.结论 K4M9、K4M10菌株有望作为微生态制剂用于细菌性阴道炎的临床防治.
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荷叶黄酮对食源性致病菌的抑菌活性初步研究
目的 比较荷叶黄酮对不同食源性致病菌的抑菌活性.方法 从干荷叶中提取荷叶黄酮,选择3种食源性致病菌进行抑菌试验,并获得小抑菌浓度(MIC);同时对荷叶黄酮的抑菌活性的热稳定性及pH稳定性进行分析.结果 从干荷叶中提取出15％荷叶黄酮粗提干粉,抑菌试验证实食源性致病菌蜡样芽胞杆菌MS10362R、枯草芽胞杆菌subsp.subtilis str.168和福氏志贺菌CDC1对荷叶黄酮的作用较为敏感,并且具有显著的浓度依赖性,其MIC分别为1.0、1.5和3.5 mg/mL.不同的热处理(50 ～90℃)对荷叶黄酮的抑菌活性影响较小,其在90℃处理后对蜡样芽胞杆菌、枯草芽胞杆菌和福氏志贺菌的抑菌活性分别降低了35.89％、23.86％和28.72％.随着pH的升高(pH 5.0～9.0),荷叶黄酮的抑菌活性呈现先升后降的趋势,但变化不大,在中性偏碱的溶液环境中抑菌活性较高.结论 荷叶黄酮抑菌活性稳定,可作为食品添加剂开发,具有潜在的应用潜力.
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片球菌素PediocinPA-1抑菌活性检测
目的 检测通过基因工程获得的片球菌素Pediocin PA-1抑菌活性.方法 采用琼脂扩散法检测片球菌素Pediocin PA-1对单核细胞增生李斯特杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、沙门菌和大肠埃希菌O157的抑菌活性.结果片球菌素Pediocin PA-1对单核细胞增生李斯特杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门菌、铜绿假单胞菌和大肠埃希菌O157等均有抑制作用.其中对单核细胞增生李斯特杆菌、沙门菌、大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用效果明显,对铜绿假单胞菌有微弱的抑制作用.结论通过基因工程获得的片球菌素Pediocin PA-1具有抑菌活性.
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铜绿假单胞菌体外抑菌活性研究
目的 观察铜绿假单胞菌抗菌物质对鲍曼不动杆菌等细菌的体外抑菌效果.方法 用交叉条带实验方法检测了铜绿假单胞菌对鲍曼不动杆菌、耐甲氧西林表皮葡萄球菌和粪肠球菌的体外抑制活性.结果 铜绿假单胞菌对鲍曼不动杆菌、耐甲氧西林表皮葡萄球菌和粪肠球菌体外抑菌活性良好,10株铜绿假单胞菌中,有8株对鲍曼不动杆菌的抑制率均达到了100％.另外有8株对耐甲氧西林表皮葡萄球菌的抑菌率均为100％；有6株对粪肠球菌的抑菌率为100％.结论 铜绿假单胞菌对上述3种致病菌具有较强的抗菌活性,具有开发前景.
关键词： 铜绿假单胞菌 鲍曼不动杆菌 耐甲氧西林表皮葡萄球菌 粪肠球菌 抑菌活性 -
乳酸菌的分离、鉴定及其生长特性
从动物粪便中分离乳酸菌,得到产酸快、代谢物抑菌活性强的乳酸菌菌株共6株.其中O-2菌株的产酸、抑菌、耐酸、耐胆盐和生长性能都优于其他菌株,是一株有潜质的有益菌菌株,经鉴定表明为乳杆菌.不同的营养配比的液体培养基进行发酵实验表明,R2培养基配料简单,成本低,发酵24h产生的菌体总数多,48h培养液的抑菌活性强,且其抑菌活性具有一定的热稳定性.
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氧化苦参碱体外抑菌活性的研究
目的 评估氧化苦参碱对条件性致病菌——大肠埃希菌的抑菌活性.方法 采用滤纸片法和96孔板法对氧化苦参碱的抑菌活性进行检测,根据不同浓度氧化苦参碱对大肠埃希菌的抑菌率,利用origin 75拟合标准曲线计算氧化苦参碱对大肠埃希菌IC50.结果 滤纸片法检测结果发现,256、128、64、32 mg/mL的氧化苦参碱对大肠埃希菌的抑菌圈大小分别为7.75、7.25、6.50和6.00 mm,而阳性对照5 000 IU/mL庆大霉素的抑菌圈大小为27.00 mm.96孔板法检测结果发现,氧化苦参碱对大肠埃希菌的抑制率均随用药剂量的增加抑制率增大,呈“S”型曲线.用药后6、12、24、48和72 h时氧化苦参碱的IC50值分别为27.27、26.81、24.75、20.29和17.O1 mg/mL.结论 氧化苦参碱对大肠埃希菌生长有抑制作用,其抑菌作用随氧化苦参碱用药作用时间的延长而增强,但抑菌活性较低.
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水产动物常见病原菌的耐药性分析及中草药体外抑菌活性的检测
目的 了解安徽省水产动物常见病原菌的耐药现状和耐药机制,探讨27种单味中草药和5个中草药复方配伍对耐药菌株的体外抑菌活性.方法 分别采用K-B纸片琼脂扩散法和双纸片增效法检测常见病原菌的耐药性和ESBLs,同时使用平板打孔法和改良微量稀释法检测中草药的体外抑菌活性.结果 4种常见病原菌的23个分离株对常用的5类抗生素均呈现不同程度的耐药性,其中铜绿假单胞菌的耐药谱广,对14种抗生素的耐药率均为100%.供试菌中仅检出2株铜绿假单胞菌为产ESBLs株,检出率为8.69%.黄连、大黄、金银花、夏枯草、地锦草、丹皮、马齿苋和连翘8种中草药对供试耐药株均有较强的抑制活性,其中黄连、大黄和金银花的抑菌活性尤为明显,其MIC值分别介于1.96～125 g/L、7.84～125 g/L和15.68～250 g/L.5个复方配伍中以复方5的配伍效果好,其MIC值为1.96～15.68 g/L,抑菌活性显著优于单味药;其次是复方1和复方3,其MIC值为1.96～62.72 g/L;复方2和复方4的配伍效果差,其MIC值为31.36～125 g/L.结论 4种23株常见病原菌均为耐药菌株,产生ESBLs是铜绿假单胞菌高度多重耐药的主要机制之一.黄连、大黄、金银花和复方5配伍对常见病原菌耐药株具有良好的抑菌活性.
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影响多粘类芽胞杆菌发酵液抑菌活性因素的研究
目的 以点青霉菌作为指示菌,研究影响植物内生多粘芽胞杆菌发酵液抑菌活性的部分因素,为鉴定发酵液的抑菌物质提供基础研究.方法 通过对多粘类芽胞杆菌发酵液进行不同处理(改变pH、加热、乙醇处理和蛋白酶酶解),采用牛津杯法观察处理后发酵液对点青霉菌抑菌活性的变化.结果 多粘类芽胞杆菌发酵液的抑菌效果在酸性条件下稳定,抑菌效果明显;而在中性和碱性范围内不稳定,抑菌效果不明显;多粘类芽胞杆菌发酵液中的有些抑菌物质具备良好的热稳定性;80%乙醇处理的发酵上清液有抑菌作用;经蛋白酶酶解后发酵液的抑菌活性变化不大.结论 多粘类芽胞杆菌产生的乙醇沉淀物具有抑菌作用;发酵液中可能含有类细菌素的抑菌物质.
