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滤纸片干血斑HIV-1 DNA检测方法的建立
目的 探索用滤纸片作血液样本的载体,建立一种简单、经济、敏感的滤纸片干血斑艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)DNA检测方法.解决HIV-1感染者全血样本采集、运输和储存过程中存在的实际困难.方法 首先用滤纸片FTA卡收集血液制成滤纸片干血斑,处理提取DNA后,针对HIV的env、gag、pol区,设计三对高度保守引物,套式PCR扩增HIV-1 DNA.进一步用HIV-1质粒DNA检测该方法的低检测限.结果 摸索出扩增滤纸片干血斑HIV-1 DNA的佳扩增条件;滤纸片干血斑样本pol区低检测限是6拷贝/μl,env区8拷贝/μl,gag区10拷贝/μl.结论 可以用滤纸片FTA卡收集HIV-1感染者的血液,制成滤纸片干血斑后检测HIV-1 DNA.该方法操作简便、经济、敏感,建议作为HIV-1抗体检测的辅助诊断方法.
关键词： 滤纸片干血斑 艾滋病病毒Ⅰ型DNA 套式聚合酶链反应 -
滤纸片干血斑中半乳糖脑苷脂-β-半乳糖苷酶的活性检测
目的：通过分别检测球形细胞脑白质营养不良( Krabbe病)滤纸片干血斑和外周血白细胞中半乳糖脑苷脂-β-半乳糖苷酶( galactocerebrosidase,GALC)的活性,判断利用滤纸片干血斑检测GALC活性的可行性。方法利用GALC特异性水解荧光底物6-十六酰胺-4-甲基伞形酮-β-D-半乳糖苷检测3例Krabbe病患儿滤纸片干血斑中该酶活性,再检测外周血白细胞中该酶活性,以验证两种检测方法结果是否一致。结果3例临床诊断为 Krabbe 病患儿滤纸片干血斑中 GALC 酶活性分别为0、0．13、0．12μmol/(h·μl),外周血白细胞GALC酶活性分别为1．22、0．92、0．8 nmol/(17 h·mg protein),两组均明显低于正常参考值。结论两种方法检测GALC酶活性结果一致,利用滤纸片干血斑行酶活性检测方法简便快速,可作为临床 Krabbe病筛查时检测酶活性的新方法。
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滤纸片干血斑技术在婴儿HIV感染早期诊断中的应用
[目的]探讨滤纸片干血斑HIV-1DNA检测技术在婴儿HIV早期感染诊断中的应用.[方法]于2009至2011年在云南省红河州5所妇幼保健院,用滤纸片干血斑和罗氏HIV-1DNA检测技术分析HIV母婴阻断项目下未满18个月的婴儿的HIV感染状况.[结果]检测 249名婴儿,其中10名婴儿HIV-1DNA阳性,与病毒载量或18月龄后的HIV抗体结果相吻合.采取母婴阻断干预措施后的婴儿感染率为3.7％,如果从孕期就开始采取干预措施的,婴儿感染率可降到0.65％,未采取任何干预措施的,婴儿感染率为16.6％.[结论]滤纸片干血斑的HIV-1 DNA检测技术的简便、快速,其定性结果与病毒载量一致,可以作为HIV母婴传播早期诊断的检测方法,可及时评估母婴阻断的效果.
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微量明胶颗粒凝集试验检测干血斑HIV-1抗体方法的建立与评价
目的 建立微量明胶颗粒凝集试验检测滤纸片干血斑HIV-1抗体的方法,评价其敏感性和特异性.方法 采集某吸毒哨点106份全血样本,制成滤纸片干血斑样本和血清样本;摸索微量明胶颗粒凝集试验中抗原明胶颗粒佳稀释倍比;比较微量明胶颗粒凝集试验检测滤纸片干血斑和ELISA检测血清HIV-1抗体的结果.结果 微量明胶颗粒凝集试验检测滤纸片干血斑HIV-1抗体的结果与ELISA检测血清HIV-1抗体的结果一致.结论 微量明胶颗粒凝集试验检测滤纸片干血斑HIV-1抗体的方法,可信度较高、操作简便成本低,为大规模开展HIV-1流行病学调查提供了另一种良好的实验室方法.
关键词： 微量明胶颗粒凝集试验 滤纸片干血斑 HIV-1 评价
