首页 > 文献资料
-
人参皂甙-Rh2对人肝癌Bel-7404细胞增殖和凋亡的影响
目的研究人参皂甙-Rh2(GS-Rh2)对肝癌Bel-7404细胞增殖和凋亡的影响及其可能的机制.方法采用MTT比色法观察GS-Rh2对体外培养的Bel-7404细胞生长的抑制作用;应用流式细胞仪检测凋亡细胞和细胞周期变化;采用免疫组化S-P法检测药物处理前后凋亡相关基因产物p53、Bax和Bcl-2蛋白表达.结果①MTT比色法测定显示,Bel-7404细胞经GS-Rh2作用后生长受抑制,呈剂量依赖性和时间依赖性,半数抑制浓度(IC50)为27.6 μg/ml.②流式细胞仪检测证实,GS-Rh2能诱导Bel-7404细胞凋亡.③当GS-Rh2浓度由12.5 μg/ml增加至50.0 μg/ml时,细胞凋亡率(AR)依次升高;但GS-Rh2浓度进一步增加时,AR未见相应升高.④GS-Rh2可将细胞周期阻滞于G1期.⑤GS-Rh2处理细胞后,突变型p53表达下调而Bax表达上调,Bcl-2在GS-Rh2处理前后无明显变化.结论①GS-Rh2能抑制体外培养的Bel-7404细胞增殖并诱导其凋亡;②GS-Rh2诱导Bel-7404细胞凋亡可能是通过上调Bax表达、下调突变型p53表达以及阻滞细胞周期而实现.
-
三七活性成分抗肿瘤作用及其免疫学机制初探
目的 通过测定小鼠黑色素瘤(B16)荷瘤小鼠外周血中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)的活性,探讨三七提取活性成分人参皂甙-Rh2(Rh2)、人参皂甙-Rg3(Rg3)抗肿瘤作用及对免疫功能的调节效应.方法 将B16肿瘤移植后的小鼠随机分为Rh2大、中、小剂量组,Rh2+Rg3组,Rg3大、中、小剂量组,环磷酰胺(CTX)组以及模型组9组.计算肿瘤抑制率、胸腺指数及脾指数;放免法测定小鼠血清TNF-α、IL-2含量.结果 Rh2与Rg3各剂量组均有一定的抑瘤效果,Rh2大剂量组、Rh2中剂量组、Rg3大剂量组以及Rh2+Rg3组与模型组瘤重比较,有统计学意义(P＜0.05),其肿瘤抑制率分别为35.5%、30.1%、33.6%与38.6%.与CTX组比较,Rh2、Rg3单用及联合用药均能明显提高外周血中TNF-α、IL-2的含量,以联合用药组为显著,且能够提高荷瘤小鼠免疫器官重量.结论 三七提取活性成分Rh2、Rg3有一定的抗B16、提高免疫功能作用.而且联合用药具有协同增效作用.
-
人参皂甙单体Rh2诱导髓性白血病细胞株凋亡的时效与量效
目的:已发现人参中某些有效组分能增强和激活机体免疫系统,具有抗肿瘤、抗衰老、抗辐射等多种生物活性作用.选取人髓性自血病细胞株HL60为模型,探讨人参皂甙单体Rh2抑制其增殖和诱导凋亡的时效量效关系.方法:实验于2006-07108在吉林医药学院临床检验实验室进行.①材料:人参皂甙单体Rh2购自吉林省宏久生物科技股份有限公司,批号050801,溶于pH 7.4磷酸盐缓冲液中配成50 g/L母液.人髓性白血病细胞株HL60购自中国科学院上海生物细胞研究所.②实验方法:取处于对数生长期的HL60细胞制备3×108L-1细胞悬液,接种后6 h分别加入终浓度为5,10,20,40,80 mg/L的人参皂甙单体Rh2 100 μL,于加药48 h后采用MTT比色法检测人参皂甙单体Rh2对HL60细胞生长的抑制作用,计算抑制率和半数抑制浓度.选择半数抑制浓度的人参皂甙单体Rh2处理HL60细胞,分别于作用 6,12,24,48,72 h后采用MTT比色法测定抑制率,并与未加药对照组进行比较.半数抑制浓度的人参皂甙单体Rh2作用48 h时倒置显微镜下观察HL60细胞形态,吉姆萨染色观察细胞凋亡情况.结果:①量效关系:人参皂甙单体Rh2浓度为5,10,20,40 meJL时,处理48 h后HL60细胞牛长抑制率呈升高趋势(F=9.45,P＜0.01),具有明显的剂量依赖性;至80mg/L时抑制率与40mg/L基本相似.加药48 h后半数抑制浓度为13.0mg/L.②时效关系:13.0mg/L人参皂甙单体Rh2处理HL60细胞6,12,24,48,72 h后,抑制率逐渐升高(F=9.32,P＜0.01),呈时间依赖性.③HL60细胞形态观察:与未加药对照组比较,经13.0 mg/L人参皂甙单体Rh2处理后HL60细胞数量明显减少,细胞分散,体积缩小,细胞核呈碎片状.④凋亡细胞吉姆萨染色检测:经13.0 mg/L人参皂甙单体Rh2处理后,HL60细胞出现核染色质浓缩、呈周边凝聚,核膜裂解形成凋亡小体、胞质出现空泡但胞膜完整的典型细胞凋亡形态学改变.结论:人参皂甙单体Rh2能有效抑制体外培养HL60细胞的增殖,并诱导其凋亡,干预效果呈时间和剂量依赖.
-
人参皂甙单体Rh2对K562细胞增殖和凋亡作用的实验研究
目的 研究人参皂甙单体-Rh2(GS-Rh2)对人K562细胞增殖和凋亡作用的影响.方法 采用MTT比色法观察GS-Rh2对体外培养的K562细胞生长的抑制作用;在光学显微镜下观察不同浓度GS-Rh2对K562细胞的凋亡作用及计数凋亡率(AR).结果 MTT比色法测定显示,细胞经GS-Rh2作用后生长受抑制,呈剂量依赖性和时间依赖性,半数抑制浓度(IC50)为25.8 μg/ml.结论 GS-Rh2能抑制体外培养的K562细胞增殖并诱导其凋亡.
-
人参皂甙-Rh2诱导人肝癌Bel-7404细胞凋亡的作用
目的研究人参皂甙-Rh2(GS-Rh2)诱导肝癌Bel-7404细胞凋亡的作用.方法应用流式细胞术检测GS-Rh2对肝癌Bel-7404细胞凋亡的诱导作用以及对细胞周期的影响.结果流式细胞术证实GS-Rh2具有诱导凋亡作用,细胞凋亡率(AR)随GS-Rh2浓度增高和作用时间延长而升高,当GS-Rh2浓度由12.5μg/ml增至50.0μg/ml时,AR由16.2%升高至27.5%,但GS-Rh2浓度由50.0μg/ml进一步增至100.0μg/ml后,AR未见相应升高;GS-Rh2可将细胞周期阻滞于G1期.结论GS-Rh2能诱导体外培养的Bel-7404细胞凋亡;GS-Rh2诱导Bel-7404细胞凋亡可能与细胞周期阻滞有关.
-
人参皂甙-Rh2对Ara-c诱导HL60细胞增殖抑制和凋亡作用的影响
目的 探讨人参皂甙单体Rh2(GS-Rh2)对阿糖胞苷(Ara-c)抗白血病作用的影响. 方法 体外培养人髓性白血病细胞株(HL60)并随机分为三组,其中Ara-c组加入终质量浓度分别为5.0～40.0 μg/ml的Ara-c,GS-Rh2组加入终质量浓度为4.0～32.0 μg/ml的GS-Rh2,联合组加入终质量浓度为4.0 μg/ml的GS-Rh2及上述质量浓度Ara-c.48 h后采用MTT法测定三组HL60细胞的增殖抑制率(IR),并计算半数抑制浓度(IC50)、合用指数(CI)、增效倍数及合并效应与期望合并效应的比值(q);倒置显微镜及常规瑞-吉染色法观察细胞凋亡形态.结果 Ara-c组、GS-Rh2组的IC50分别为32.0、13.0,联合组Ara-c的IC50为14.5 μg/L,显著低于Ara-c组(P＜0.001);联合组CI为0.76, 4.0 μg/ml GS-Rh2对Ara-c的增效倍数为2.21,Ara-c质量浓度为5.0、10.0、20.0、40.0 μg/ml时的 q分别为1.42、1.39、1.36、1.21;联合组细胞凋亡形态较其他两组明显.结论 GS-Rh2可提高HL60细胞对Ara-c的敏感性,减少Ara-c的临床用药剂量和毒副作用,加强Ara-c的疗效;此为临床治疗白血病提供了新的思路.
-
维甲酸与人参皂甙-Rh2或半边旗二萜类化合物5F协同诱导肝癌细胞凋亡的研究
目的 观察维甲酸与人参皂甙-Rh2或半边旗二萜类化合物5F协同诱导肝癌细胞凋亡及对FaS蛋白表达的影响.方法 体外培养肝癌细胞,设RA、GS-Rh2、5F、RA+GS-Rh2、RA+5F 3个实验组和对照组,分别收集其药物作用24和48 h后的培养细胞,应用流式细胞仪(FCM)检测肝癌细胞的凋亡率及Fas蛋白的表达.结果 肝癌细胞药物作用48 h时,RA+GS-Rh2组、RA+5F组与RA组或GS-Rh2组或5F组比较凋亡细胞数和Fas蛋白的表达有显著增高(P<0.05),但在24 h时,RA+Gs-Rh2组、RA+5F组与RA组比较"亚G1峰"差异无显著性(P>0.05).结论 维甲酸与人参皂甙-Rh2或半边旗二萜类化合物5F协同作用可以增强诱导肝癌细胞凋亡,促进Fas蛋白的表达.
