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甲状腺癌组织差异表达cDNA消减文库的构建与鉴定
目的:应用抑制性消减杂交技术,构建人甲状腺癌与正常甲状腺差异表达的cDNA消减文库.方法:分别从甲状腺癌及正常甲状腺组织中提取总RNA,应用高效、灵敏的抑制性消减杂交技术,构建成功cDNA消减文库,再转染大肠杆菌进行文库扩增.结果:构建成功具有高消减效率的人甲状腺癌组织cDNA消减文库, 文库扩增得到了400个克隆,随机挑取50个制备质粒,酶切分析均得到50～400 bp大小插入片段,这些片段可能就是载有高度特异性的目的片段,结论:人甲状腺癌组织cDNA消减文库的建立为进一步克隆甲状腺癌特异性表达的新基因奠定了基础.
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甲状腺乳头状癌中D2-40、EGFR和VEGF的表达及BRAF基因突变
目的 探讨甲状腺乳头状癌中D2-40、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达与鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(v-raf murine sarcoma viral oncogene homolog B1,BRAF)基因突变及其临床意义.方法选取87例甲状腺乳头状癌和48例甲状腺乳头状增生手术切除标本,应用扩增阻碍突变系统(amplification refractory mutation system,ARMS)及免疫组织化学法检测甲状腺乳头状癌和乳头状增生中BRAF基因突变情况和D2-40、EGFR及VEGF蛋白表达情况.结果甲状腺乳头状癌中BRAF基因突变率与D2-40、EGFR和VEGF蛋白阳性表达率均高于甲状腺乳头状增生(均P＜0.05).甲状腺乳头状癌有淋巴结转移组BRAF基因突变率和D2-40、EGFR及VEGF蛋白阳性表达率均高于无淋巴结转移组(均P＜0.05).结论BRAF突变检测联合D2-40、EGFR及VEGF检测可以提高甲状腺乳头状癌的确诊率,并可能是预测甲状腺乳头状癌淋巴结转移与否的重要指标.
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nm23-H1、p16抑癌基因蛋白在甲状腺肿瘤中的表达及其临床意义
目的:探讨nm23-H1、p16抑癌基因蛋白在甲状腺肿瘤中的表达意义.方法应用SP免疫组化方法检测了54例甲状腺癌、16例腺瘤、10例甲状腺非瘤病变及癌旁正常组织中nm23-H1、p16抑癌基因蛋白的表达.结果 nm23-H1、p16基因在正常组织中阳性表达率为分别为100%(12/12)及91.7%(11/12),但两者均以弱表达为主,并且阳性着色均定位于胞核.甲状腺腺瘤及分化型甲状腺癌中nm23-H1、p16表达率及表达强度均增强(P<0.05),而甲状腺未分化癌中nm23-H1及p16表达率及表达强度则降低(P<0.01).nm23-H1及p16蛋白表达与甲状腺癌的分化程度呈正相关(P<0.01),与颈淋巴结转移无相关性,但nm23-H1与包膜侵犯呈负相关(P<0.05),nm23-H1、p16在甲状腺癌中的表达有相关关系(P<0.01).结论 nm23-H1及 p16在甲状腺癌的表达中有相关关系(P<0.01).以nm23-H1及p16蛋白失活与甲状腺未分化癌的发生密切相关,但与颈淋巴结转移无关.nm23-H1及p16可作为临床判断恶性程度及生物学行为的一个参考指标.
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南汇地区家族性非髓样甲状腺癌易感基因筛查结果分析
[目的]筛查南汇地区家族性非髓样甲状腺癌(FNMTC)易感基因.[方法]选择南汇地区2008年2月至2017年2月确诊的120个家系284例FNMTC患者的临床资料,均进行DNA提取与测序分析,比较2例患者家系和≥3例患者家系的病理特征的差异,分析FNMTC患者突变筛选情况反基因突变相同的同一家系FNMTC患者临床病理特征.[结果]2例患者家系和≥3例患者家系比较,两组累及两代的家系占比(14.10％和33.33％)比较有统计学意义(P＜0.05).终筛选出高质量胚系突变373个,其中同一家系的患者携带相同的高质量胚系突变的家系74个,2例患者家系51个,≥3例患者家系患者23个,分布于TCO1、APC、NMTC1、f PTC/PRN、MSH2、BRAF、MSH6、MNG1、ATM、BRCA1、BRCA2基因,且突变基因分布比较无统计学意义(P＞0.05),此11个突变基因可能为这74个家系易感FNMTC的遗传因素.基因突变相同的同一FNMTC家系中患者多发病灶、合并甲状腺炎、被膜侵犯、淋巴结转移、累及两代的家系比例显著高于基因不同或未见突变基因的家系(P＜0.05).[结论]南汇地区FNMTC患者的遗传易感基因包括TCO1、APC、NMTC1、fPTC/PRN、MSH2、BRAF、MSH6、MNG1、ATM、BRCA1、BRCA2,检测上述基因有助于早期发现FNMTC患者的发病风险.
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甲状腺肿瘤中p16蛋白表达的临床病理研究
目的探讨抑癌基因蛋白p16表达与甲状腺肿瘤生物学行为之间的关系.方法采用免疫组织化学技术(SABC法)检测50例甲状腺肿瘤中p16蛋白的表达,对其与甲状腺肿瘤的病理类型、组织学分级及TNM分期之间的关系进行研究.结果 p16蛋白在甲状腺腺瘤的阳性表达率(86.7%)明显高于甲状腺癌的表达率(45.7%),差异有显著性(P<0.05).在甲状腺癌中,p16蛋白表达与组织分化程度有关,高分化者其表达水平明显高于低分化者(66.7% vs 25%,P<0.05),但p16蛋白表达与甲状腺癌病理类型、肿瘤大小及临床有无转移均无明显关联(P>0.05);此外,甲状腺癌中p53及bcl-2癌基因蛋白的表达与p16蛋白表达均无关联(P>0.05).结论 p16蛋白表达的缺失参与了甲状腺癌的发生及分化,但与甲状腺癌的临床进展联系不大.
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甲状腺癌中E-cadherin的表达及临床意义
目的研究E-cadherin在甲状腺癌中的表达及其临床意义.方法应用免疫组化方法,对19例甲状腺乳头状腺癌,12例甲状腺滤泡状腺癌和17例甲状腺髓样癌进行了E-cadherin表达的检测.结果 8例(42.1%)甲状腺乳头状腺癌E-cadherin表达阳性,5例(41.7%)甲状腺滤泡状腺癌E-cadherin表达阳性,11例(64.7%)甲状腺髓样癌E-cadherin表达阳性.E-cadherin表达在甲状腺癌各病理类型与甲状腺腺瘤之间比较,其阳性率差异有显著性;但在甲癌的三种病理类型之间其阳性率差异无显著性.E-cadherin在甲状腺癌中的表达与年龄有相关性,但与其它各临床病理参数无明显的相关性.结论在甲状腺癌中上皮细胞表面的E-cadherin有一定的破坏或功能不正常,但尚不能成为甲状腺癌独立的预后指标.
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CD44v6在甲状腺癌组织中的表达及其意义
目的探讨甲状腺癌组织中CD44v6抗原的表达及其临床意义.方法应用微波-LSAB免疫组织化学法,检测50例甲状腺癌、45例甲状腺腺瘤和20例癌旁甲状腺组织中CD44v6的表达.结果甲状腺癌中CD44v6表达阳性率(64.0%)显著高于甲状腺腺瘤(37.0%)和癌旁甲状腺组织(25.0%)(均P<0.05).CD44v6表达与甲状腺癌组织类型无关;CD44v6表达阳性率在有淋巴结转移者显著高于无淋巴结转移者(P<0.05);病理分期Ⅲ～Ⅳ期病例显著高于病理分期Ⅰ～Ⅱ期病例(P<0.05).CD44v6阳性的甲状腺癌复发及死亡率显著高于CD44v6阴性者(P<0.05).结论 CD44v6表达对甲状腺癌恶性程度判断、生物学行为预测和预后评估是一种有意义的客观指标.
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甲状腺癌CD44的表达和临床意义
目的研究甲状腺癌组织中CD44分子的表达和临床意义.方法采用ABC免疫组织化学法.结果 10例正常甲状腺组织CD44无表达,单纯性甲状腺肿和甲状腺瘤CD44阳性表达率分别为20%,30%;40例原发性甲状腺癌组织中,CD44阳性表达率85.0%,明显高于前两者(均P<0.01),且CD44阳性率随着组织分化程度的降低而增高;伴有淋巴结转移甲状腺癌的CD44表达明显高于无淋巴结转移的甲状腺癌组织(P<0.01).结论 CD44可能是反映甲状腺癌生物学行为和预后的重要标记物,阳性表达者可能其恶性度高和预后不良.
