首页 > 文献资料
-
中国汉族人群前列腺癌易感性与TLR4基因单核苷酸多态性的研究
目的 探讨Asp299Gly(rs4986790)、Thr399Ile(rs4986791)、rs11536889单核苷酸多态性(SNP)与前列腺癌(PCa)易感性和严重程度的关系.方法 采用病例对照研究方法,选取组织学证据确诊的PCa患者96例为PCa组,良性前列腺增生(BPH)患者87例为BPH组,健康者92例为健康对照组.记录研究对象的临床资料并计算Gleason评分,PCR-RFLP法分析各组的基因型.结果 PCa组、BPH组及健康对照组的年龄、前列腺癌家族史所占比例、前列腺特异抗原(PSA)水平比较,差异均有统计学意义(P=0.000);PCa组、BPH组及健康对照组的Asp299Gly和Thr399Ile基因型频率分布比较,差异无统计学意义(P﹥0.05),但3组间rs11536889基因型频率分布比较,差异有统计学意义[PCa组/(BPH组+健康对照组),CC/GC vs GG,OR=2.152,95%CI:1.280~3.618,P﹤0.05];Gleason评分≥7分组GC+CC分布比例高于Gleason评分﹤7分组(OR=2.378,95%CI:1.042~4.427,P﹤0.05).结论 TLR4基因rs11536889 SNP可能与PCa发病和病情严重程度相关.
-
siRNA沉默TLR4表达对人肺腺癌A549细胞增殖和侵袭的影响
目的:探讨靶向TLR4基因的小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)对人肺腺癌A549细胞增殖和侵袭的影响.方法:设计并合成针对TLR4基因的3条siRNA(siRNA722、siRNA1673和siRNA2560)及1条与TLR4基因无同源性的阴性对照siRNA,采用Real-time PCR和Western blotting方法测定干扰后A549细胞中TLR4 mRNA及蛋白的表达水平,筛选出有效抑制靶基因表达的siRNA并确定佳转染条件.TLR4特异性siRNA (TLR4-siRNA)转染A549细胞后,采用CCK-8法和Tr-answeH小室法分别检测沉默TLR4对A549细胞增殖和侵袭能力的影响.结果:与阴性对照相比,siRNA1673在转染48 h后对TLR4 mRNA和蛋白表达的抑制为明显[(0.45±0.03)vs(0.83±0.02),(0.23±0.06)vs(0.98士0.09);均P＜0.01].TLR4-siRNA转染72 h后A549细胞增殖活性显著下降[(0.77±0.01)vs(0.98 ±0.11)、(0.93 ±0.04),P＜0.01];转染48 h后,TLR4-siRNA组A549细胞的侵袭细胞数明显少于阴性对照组[(23.60±2.88) vs(59.80±5.54)个,P＜0.01].结论:TLR4-siRNA能够沉默A549细胞中TLR4基因表达,抑制A549细胞的增殖和侵袭能力,TLR4可能成为肺癌基因治疗的候选靶点.
-
TLR4基因在宫颈癌组织中的表达及其与HIF-1α的相关性
目的 探讨TLR4基因与宫颈癌发生的关系及其与HIF-1α的相关性.方法 采用RT-PCR法,检测80例HPV阳性宫颈病变标本中TLR4和HIF-1α表达情况.结果 随着宫颈病变程度地加重,TLR4和HIF-1α基因水平逐渐上升,差异有显著性意义(F/P值分别为 16.23/0.0041和15.42/0.0072);且宫颈癌组织中,TLR4表达与HIF-1α表达呈正相关性(γ=0.491,P<0.05).结论 TLR4基因参与了宫颈癌的发生发展,且其表达与HIF-1α表达相关.
-
TLR4基因rs1927914位点多态性与甲状腺疾病的关联分析
目的 探讨Toll样受体4(TLR4)基因的单核苷酸多态性与Graves病(GD)、桥本甲状腺炎(HT)、单纯性甲状腺肿(SG)的相关性.方法 选取2016年河北省沧州市居民甲状腺疾病调查的GD患者(GD组,n=94)、HT患者(HT组,n=54)、SG患者(SG组,n=56)及对照组为研究对象,应用PCR酶切鉴定结合直接测序方法进行基因分型.结果 等位基因C和T在3种甲状腺疾病和对照组中比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);3种基因型CC、CT、TT在GD组、HT组中的分布与对照组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);SG组与对照组比较,隐性遗传模型显示基因突变与疾病呈正相关(P=0.040,OR=1.923,95％CI:1.025～3.609).结论 TLR4基因多态性可能与GD、HT的发病风险无相关性,携带TT基因型可能会增加SG的发病风险.
-
1人TLR4胞外区基因重组腺病毒载体的构建与鉴定
目的 构建并鉴定人TLR4胞外区基因重组腺病毒载体.方法 以pUCm-TLR4质粒为模板,运用PCR技术扩增TLR4胞外区目的 基因片段,片段回收后经酶切连接穿梭质粒pAdTrack-CMV上,获得重组腺病毒质粒pAdTrack-CMV-TLR4.通过Kpn Ⅰ和HindⅢ双酶切,测序鉴定后,将鉴定正确的质粒经PmeⅠ酶切线性化后,转化到含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的感受态细菌BJ5183中,进行同源重组,卡那抗性筛选阳性克隆,提取质粒,用脂质体介导转染293细胞,通过观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达及PCR技术,Western blot等方法鉴定重组腺病毒,并进行病毒滴度测定.结果 人TLR4胞外区基因重组腺病毒载体构建正确,病毒滴度为3.2×109pfu/mL.结论 成功构建了人TLR4胞外区基因重组腺病毒载体,为下一步实验奠定基础.
-
TLR4基因多态性与大动脉粥样硬化性脑梗死及血管床选择性的关联分析
目的 探讨中国北方汉族人群TLR4基因多态性与大动脉粥样硬化性(large artery atherosclerotic,LAA)脑梗死及脑动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)血管床选择性的关系.方法 按照TOAST病因分型选择286例LAA型脑梗死患者及300名健康对照者,并将LAA组按照脑动脉狭窄支数、颅内/外动脉狭窄、是否合并周围动脉狭窄(心血管、肾动脉、下肢动脉)、前/后循环动脉狭窄4种情况分为亚组.用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性或直接测序法检测TLR4 3个单核苷酸多态性位点(rs1927914、rs1927911、rs2149356),并通过Haploview软件进行单倍型分析.结果 rs1927911位点基因型频率、rs2149356位点基因型及等位基因频率在LAA组与对照组间差异有统计学意义(P＜0.05),rs1927914位点在两组间差异无统计学意义(P＞0.05).所检3个位点多态在4种亚组中分布均未见明显差异(P＞0.05).单倍型分析显示在LAA组,单倍型H2、H8显著低于对照组,单倍型H3显著高于对照组(P＜0.05).结论 中国北方汉族人中,TLR4基因多态性与LAA型脑梗死相关,其与AS病变的血管床选择性未发现相关性.
关键词： TLR4基因 动脉粥样硬化性脑梗死 遗传多态性 单倍型 -
pri-miR-21重组腺病毒载体构建及其对TLR4基因调控的研究
目的:构建能高效表达成熟miR-21小分子的腺病毒载体,探讨其对TLR4基因的靶向调控关系.方法:以正常小鼠基因组DNA为模板,PCR扩增pri-miR-21基因,克隆至穿梭载体pAdTrack-CMV中经PCR、酶切及基因测序分析正确无误后,与pAdEasy-1腺病毒骨架质粒进行同源重组,并利用293A细胞,包装成pri-miR-21重组腺病毒感染HeLa细胞,通过Westem blot检测TLR4的蛋白表达水平,验证miR-21与TLR4靶向调控的关系.结果:经PCR、酶切、测序及GFP表达证实,成功构建携带pri-miR-21基因的重组腺病毒载体并制备出高滴度重组病毒.Western blot证实,miR-21可抑制TLR4蛋白的表达.结论:所制备的小鼠pri- miR-21重组腺病毒,可以高效表达成熟miR-21小分子,能够抑制靶基因TLR4的表达.
关键词： pri-m1R-21 重组腺病毒载体 TLR4基因 靶向调控 -
Toll样受体4基因多态性与前列腺癌易感性的相关性
目的:利用Meta分析的方法系统评价Toll样受体4基因(Toll-like receptor 4,TLR4)多态性(rs10759932、rs11536889和rs1927914)与前列腺癌(prostate cancer,PCa)发病风险的关系.方法:检索PubMed、EMbase、Google学术、万方和中国知网数据库,语种不限,筛选出1960年1月1日至2016年6月10日符合纳入和排除标准的文献,应用STATA分析软件对各项研究进行异质性检验,计算合并OR值及其95%CI.结果:终纳入6篇文献,包含3个位点12项病例-对照研究,计病例组和对照组分别为9520和7690例.对于rs11536889多态性位点,在隐性模型状态下,与前列腺癌发病显著相关(BB vs BA+AA:OR=0.247,95%CI:0.171~0.357;P=0.000).然而对于rs10759932和rs1927914多态性位点在各比较模型下均与肿瘤无相关性.此外,对于rs1927914多态性位点,在以人种为分组依据的亚组分析中,可发现高加索人种与前列腺癌易感性显著相关(BB vs BA+AA:OR=0.538,95%CI:0.335~0.863;P=0.010).结论:本研究证明TLR4基因rs11536889多态性位点与前列腺癌易感性相关,即rs11536889的BB基因型可能显著降低人群患前列腺癌的风险.
