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地塞米松对人羊膜上皮细胞Wish细胞株水通道蛋白8表达的影响
目的 探讨地塞米松(dexamethasone,DEX)对人羊膜上皮细胞Wish细胞株水通道蛋白8 (aquaporin 8, AQP8)表达的影响.方法 培养人羊膜上皮细胞Wish株,应用1 μg/mL,10 μg/mL,20 μg/mL,40 μg/mL,100 μg/mL地塞米松培养液[实验组(1 μg/mL组、10 μg/mL组、20 μg/mL组、40 μg/mL组、100 μg/mL组)]孵育48 h;对照组为未加地塞米松处理的人羊膜上皮细胞Wish株,采用免疫荧光细胞化学法(immunofluoresecnce chemistry)、RT-PCR法、Western blot法,检测在不同浓度地塞米松作用下,Wish细胞AQP8 mRNA及蛋白表达水平. 结果 人羊膜上皮细胞Wish株可见,AQP8 mRNA及蛋白表达.10 μg/mL, 20 μg/mL, 40 μg/mL, 100 μg/mL地塞米松对人羊膜上皮细胞Wish株AQP8 mRNA及蛋白表达,具有增强性调节作用.其中,40 μg/mL组的AQP8 mRNA及蛋白表达水平达峰值,与对照组比较,差异有显著意义 (P<0.05). 结论 地塞米松可增加羊膜上皮细胞AQP8的表达,从而为治疗羊水异常提供新的思路.
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水通道蛋白8在人羊膜上皮细胞WISH株的表达和定位
目的:研究水通道蛋白8(AQP8)在人羊膜上皮细胞WISH株的表达和定位,羊水膜内吸收的分子机制.方法:培养人羊膜上皮细胞WISH株,采用Western blot技术检测WISH细胞AQP8蛋白表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测WISH细胞AQP8 mRNA的表达,免疫荧光组织化学方法检测WISH细胞上 AQP8的分布.结果:WISH细胞能表达较低水平的AQP-8 mRNA,WISH细胞AQP8蛋白在34ku处有一明显的糖基化条带.在细胞内微粒体膜和细胞膜上均检测到标记AQP8的荧光.结论:人羊膜上皮细胞WISH有AQP8的蛋白和mRNA表达,AQP8可能介导了羊水膜内吸收.