首页 > 文献资料
-
二氮嗪对长时程低温保存移植鼠心ATP酶的影响及意义
目的 观察线粒体ATP敏感性钾离子通道开放剂二氮嗪(Diazoxide,DE)对移植鼠心心肌细胞膜Na+-K+-ATPase和肌浆网Ca2+-ATPase活性的影响,并探索DE处理后Celsior液对长时程低温保存鼠心的有效性.方法 SD雄性大鼠192只随机分为4组,即A组(单纯Celsior液保存5h)、B组(30μmol/L DE+Celsior液保存5h)、C组(30μmol/L DE+Celsior液保存8h)、D组(30μmol/L DE+Celsior液保存10h).利用改良Heron法大鼠颈部异位心脏移植模型,供体鼠心按各组要求保存后移植于受体,观察移植心脏30s内复跳率、心率以检测心肌细胞膜Na+-K+-ATPase和肌浆网Ca2+-ATPase活性和心肌超微结构检查等.结果 ⑴复跳率和心率:心脏移植术后30s复跳率各组均无显著性差异;B组、C组心率明显较A组、D组快,A组、D组心率差异无显著性意义;⑵两酶活性测定:B、C、D 3组心肌细胞膜Na+-K+-ATPase活性随着保存时间的延长呈显著递减性降低,但仍高于A组,仅D组与A组差别无显著性意义;B组、C组肌浆网Ca2+-ATPase活性显著高于D组、A组,D组与A组差别无统计学意义.⑶心肌超微结构:各组心肌结构保护均较好,肌纤维排列整齐,肌节清,线粒体肿胀不明显;B、C、D3组线粒体嵴结构较为清楚.⑷D组和A组各指标差别均无显著性意义.结论 :移植鼠心在长时程冷缺血期间,DE对心肌组织ATP酶活性有较好的保护作用,此作用随着保存时间的延长而减弱.且DE处理后Celsior液冷保存鼠心10h仍与国际公认的Celsior液安全冷保存时间5h效果相当.
-
Celsior器官保存液及其对供心保护的研究进展
器官移植时供体器官的高效保存是保证移植成功的关键之一.器官保存液的改进与发展,大大提高了器官移植的成功率.施尔生液(Celsior液)是一种新型的器官保存液,1994年由Pasteur-Merieux研制成功以来,逐渐受到人们的重视,尤其在欧洲.
-
Celsior液、HTK液和UW液对心脏保存效果的实验研究
目的应用Langendorff灌注模型低温灌注离体鼠心6h,检验器官保存液Celsior液、HTK液和UW液对心脏保存的效果.方法实验分为3组,每组8只Wistar大白鼠.麻醉并抗凝后,快速取下鼠心并悬挂在Langendorff灌注模型上灌注,测定血流动力学基础值.分别用三种器官保存液灌注离体鼠心,在4℃下低温浸泡保存6h.重新复温、复灌,再次测定血流动力学值和冠状动脉流量,留取标本分别测定心肌水含量、心肌酶漏出量、心肌细胞ATP和CP含量和观察心肌细胞超微结构变化.结果①血流动力学恢复率,Celsior液和HTK液组均优于UW液组.②心肌酶漏出量,Celsior液和HTK液组明显低于UW液组.③ATP和CP含量,Celsior液和HTK液组高于UW液组.④超微结构变化,Celsior液组和HTK液组心肌损害轻,UW液组心肌损害较重.结论Celsior液、HTK液和UW液对心脏保护的效果均较好,均为较合适的心肌保存液.Celsior液和HTK液对心脏保存的效果无显著差异,但均优于UW液.
-
零下非结冰UW液、Celsior液和HTK液保存C3A细胞的效果比较
目的 比较UW液、Celsior液和HTK液零下非结冰(-0.8℃)保存生物人工肝用C3A细胞的效果.方法 制备好的C3A细胞悬液分以下3组:UW液保存组(UW液组);Celsior液保存组(CS液组);HTK液保存组(HTK液组).各组细胞于-0.8℃低温保存72 h后,分别测定细胞存活率及死亡率(流式细胞术)、LDH释放、尿素合成功能及白蛋白分泌功能.结果 UW液及Celsior液比HTK液显著提高了零下非结冰保存72 h的C3A细胞的存活率[(84.34±4.25)%,(83.53±3.73)% vs (75.65±3.01)%,P<0.001]和细胞内ATP含量[(5.54±1.44)μg/106 个细胞,(5.51±1.31)μg/106个细胞 vs (2.75±1.03)μg/106 个细胞,P<0.001];抑制了LDH释放(P<0.001);更好地维持了细胞尿素合成功能[(0.63±0.10)mmol/L,(0.62±0.06)mmol/L vs (0.39±0.04)mmol/L,P<0.001]和白蛋白分泌功能[(1.99±0.38)g/L,(1.96±0.24)g/L vs (1.50±0.18)g/L,P<0.05].UW液与Celsior液零下非结冰保存C3A细胞的效果无差异.结论 同HTK液相比,使用UW液或者Celsior液零下非结冰(-0.8℃)保存C3A细胞可以明显地提高复温后细胞存活率和细胞内ATP含量,降低低温损伤引起的LDH释放,有效地保护肝细胞尿素合成功能和白蛋白分泌功能.UW液同Celsior液零下非结冰保存C3A细胞的效果无差异,保存时间不宜超过72 h.
-
Fas/FasL和Caspase-3在二氮嗪强化Celsior液超时冷保存鼠心移植中的表达及其意义
目的 研究心肌线粒体三磷腺苷敏感性钾离子通道(mitochondrial ATP-sensitive potassium channel,MitoKATPC)开放剂二氮嗪(diazoxide,DE)添加入Celsior液中对大鼠供心超时冷保存的效果,并探讨其抗心肌凋亡作用的可能机制.方法 SD大鼠112 只,随机分成7组,每组16只(供者、受者各8只).(1)Celsior组:保存液为单纯Celsior液;(2)DE组:保存液为30 μmol/L DE+Celsior 液;上述两组又以保存时间不同分为5 h、8 h、10 h组.(3)5-HD组:保存液为Celsior液+DE (30 μmol/L)+5-HD(100 μmol/L),保存时间为5 h.利用改良Heron法建立大鼠颈部异位心脏移植模型,观察移植术后5 min内心脏恢复跳动、心率表现;采用原位末端标记染色法检测心肌细胞凋亡,用免疫组织化学方法检测心肌Fas/FasL和Caspase-3蛋白的表达情况;以及用电镜观察心肌超微结构等.结果 (1)除5 h保存时间的心脏外,DE各组心脏移植术后30 s复跳率较相应Celsior液组显著提高;DE组心率明显较Celsior液组快(P<0.05),DE 10 h组与Celsior 5 h组无明显区别(P>0.05);(2)与Celsior液组相比,DE处理明显降低各组心肌细胞凋亡指数(P<0.05),减少Fas/FasL和Caspase-3蛋白的表达(均为P<0.05);DE 10 h组与Celsior 5 h组各指标比较差异无统计学意义(P>0.05);(3)5-HD可取消上述DE的作用;(4)DE各组和Celsior 5 h组心肌超微结构保护相对较佳:肌纤维排列整齐,肌节清,线粒体肿胀不明显,嵴结构较为清楚;Celsior 10 h组心肌结构尚清楚,但肌纤维疏松,个别区域肌丝肌节溶解,线粒体肿胀较明显,嵴模糊.结论 DE强化Celsior液冷保存的鼠供心,可能通过激活MitoKATPC,明显抑制Fas/FasL和Caspase-3蛋白的表达,保护线粒体功能和结构的完整,从而使心肌细胞凋亡减少,减轻缺血再灌注损伤,使得DE强化Celsior液超时(10 h)冷保存的鼠供心移植安全有效.
-
UW液、Celsior液和HTK液低温保存生物人工肝用L-02细胞的效果比较
目的 比较UW液、Celsior液和HTK液4℃常规低温保存生物人工肝用L-02细胞的效果.方法 制备好的L-02细胞悬液分以下3组:UW液保存组(UW液组);Celsior液保存组(CS液组);HTK液保存组(HTK液组).各组细胞于4℃低温72 h后,分别测定细胞存活率及死亡率(流式细胞术),ALT及LDH释放,尿素合成功能及白蛋白分泌功能.结果 UW液较Celsior液和HTK液显著提高了4℃常规低温保存72 h的L-02细胞的存活率[(60.05±4.23)% vs (50.12±3.99)%、(44.20±4.67)%],均P<0.05;降低了细胞死亡率[(39.95±4.23)% vs (49.88±3.99)%、(55.80%±4.67)%],均P<0.05;抑制了ALT、LDH释放(均P<0.05);更好地维持了L-02细胞尿素合成功能[(1.03±0.23)mmol/L vs (0.80±0.14)mmol/L、(0.48±0.05)mmol/L]和白蛋白分泌功能[(8.36±1.38)mg/L vs (6.41±1.25)mg/L、(5.19±0.41)mg/L),均P<0.05.结论 与Celsior液和HTK液相比,使用UW液4℃常规低温保存L-02肝细胞可以明显提高复温后细胞存活率,降低低温损伤引起的ALT、LDH释放,有效保护肝细胞尿素合成功能和白蛋白分泌功能,但保存时间不应超过72 h.
-
Celsior器官保存液及其研究现状
目的报道Celsior液的组成特点、保存原理以及动物实验和临床应用研究现状.方法采用国外文献进行分析与评价.结果 Celsior液属于细胞外液型多器官保存液,广泛用于心脏、肾脏、肺脏、肝脏、胰腺等脏器的保存.结论 Celsior液对于各种器官的保存是安全有效的,具有与UW液同样的效果,而且可以实现单独应用一种冷保存液进行腹腔和胸腔内多器官原位灌洗和保存两个步骤.
-
三种肝保存液低温保存生物人工肝用C3A细胞的效果比较
目的 比较UW液、Celsior液和HTK液4 ℃常规低温保存生物人工肝用C3A细胞的效果.方法 制备好的C3A细胞悬液分以下3组:UW液保存组(UW液组);Celsior液保存组(CS液组);HTK液保存组(HTK液组).各组细胞于4 ℃低温保存72 h后,分别测定细胞存活率及死亡率(流式细胞术),丙氨酸氨基转移酶(ALT)及乳酸释放,尿素合成功能及清蛋白分泌功能.结果 UW液及Celsior液比HTK液显著提高了4 ℃低温保存72 h的C3A细胞的存活率(78.56%±4.67% vs 76.03%±3.53%,60.54%±3.18%,P<0.05);抑制了C3A细胞低温保存时ALT释放及乳酸的释放(P<0.05);更好地维持C3A细胞尿素合成功能[(0.52±0.11)mmol/L vs (0.51±0.06)mmol/L,(0.32±0.05)mmol/L,P<0.05]和清蛋白分泌功能[(1.79±0.26) g/L vs (1.75±0.21)g/L,(1.20±0.17)g/L,P<0.05].UW液同Celsior液4 ℃低温保存C3A细胞的效果无差异.结论 同HTK液相比,使用UW液或者Celsior液4 ℃保存C3A细胞可以明显的提高复温后细胞存活率,降低低温损伤引起的ALT释放和乳酸释放,有效的保护肝细胞尿素合成功能和清蛋白分泌功能.
