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用RAPD技术分析出血性大肠杆菌O157∶H7
目的应用RAPD技术分析肠出血性大肠杆菌O157∶H7 DNA多态性并对其分型.方法用两条10bp的随机引物对3株肠出血性大肠杆菌O157∶H7和3株其它病原性大肠艾希氏菌进行扩增,扩增产物经凝胶电泳后得到指纹图.结果共得到12个不同的DNA指纹图谱,经统计软件SPSS系统聚类分析得到两个不同的分类树状图.结论 RAPD技术方法简便、快速、分辨力高,在肠出血性大肠杆菌O157:H7分子流行病学研究中有较大的应用前景.
关键词： 肠出血性大肠杆菌O157∶H7 随机引物PCR DNA多态性 -
随机扩增DNA多态性技术在A组链球菌分型上的应用
目的了解A组乙型溶血性链球菌的基因分型状况.方法采用随机扩增多态性DNA技术(Random amplified polymorphic DNA,RAPD),对1988～1994年度,从广东城市和农村,1993～1994年度,从湖北、吉林9～11岁学龄儿童分离的179株GAS进行RAPD分析.结果①同一T型的菌株有特征性条带,但有些亚型带型间差异较大;②不同T型间可有相同的带型;③分型率比T分型高,达到96.6%;④有主导RAPD型菌株流行的情况存在.结论RAPD方法对GAS分型及流行病学中有一定的应用价值,可以区别同一血清型不同地区来源的GAS.
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海南汉族冠状动脉粥样硬化性心脏病人群CETP基因多态性与血脂的关系
[目的]了解CETP基因TaqIB、I405V、D442G、R451Q、A373P和I14A 6种突变的多态性与海南汉族CHD人群血脂的关系.[方法]应用等位基因特异性PCR技术,对301例海南汉族正常对照组、334例海南汉族CHD患者组中CETP基因多态位点进行检测,分析各基因型与血脂的关系.[结果]在2组人群中,TaqIB、I405V和D442G多态位点可分别检测出B1B1、B1B2、B2B2 3种基因型,II、IV、VV 3种基因型和DD、DG 2种基因型,未检测到R451Q、A373P和I14A3种突变类型.I405V和D442G 2个多态位点的基因型分布和等位基因频率在2组间存在统计学差异,且与CHD组中总胆固醇浓度升高有关;D442G多态位点的基因型分布和等位基因频率还与CHD组中高密度脂蛋白浓度升高有关.其余多态位点在2组间及与CHD血脂水平之间无差异.[结论]I405V和D442G的多态性与海南汉族CHD显著相关,且与CHD总胆固醇升高相关;D442G的多态性还与海南汉族CHD的HDL升高相关.
关键词： 胆固醇酯转运蛋白基因 DNA多态性 冠状动脉粥样硬化性心脏病 汉族 -
TNFβ-G252A基因多态性与海南黎族急性脑梗塞之间的关系
[目的]了解肿瘤坏死因子(TNFO)-G252A基因多态性与海南黎族急性脑梗塞之间的关系.[方法]应用多聚酶链反应技术(PCR)检测和比较84例动脉硬化性脑梗塞和79例正常对照人群的TNFP-G252A基因的多态性,统计各组基因型频率及各组等位基因频率.[结果]TNFβ-G252A基因多态性和频率在急性脑梗塞组与正常对照组间差异有统计学意义(x(2)=9.216,P<0.05;x(2)=93.507,P<0.05).[结论]TNFβ-G252A基因多态性与海南黎族急性脑梗塞发病相关.
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海南汉、黎族人群中ABO基因的DNA多态性
目的 研究海南汉、黎族人群中ABO基因DNA多态性及其基因频率分布的特点.方法 应用等位基因特异性聚合酶链反应检测了255例海南汉族人样本DNA和379例海南黎族人样本DNA的ABO血型基因型,根据遗传距离和聚类分析比较海南汉、黎族的ABO血型基因频率与其他群体的差异.确定其在中国地理分布上的位置.结果 用等位基因特异性聚合酶链反应技术可鉴定出6种ABO血型基因型:AA、AB、AO1、BB、BO1、O1O1,其鉴定的ABO基因分型结果 与DNA测序结果 完全符合;在海南汉族人群中O1O1、BO1、AO1、AB、AA、BB基因型的频率分别为34.90%、23.53%、22.75%、6.27%、6.27%和6.27%,A、B、O1等位基因频率分别为20.78%、21.18%和58.04%;在海南黎族人群中O1O1、BO1、AO1、AB、AA、BB基因型的频率分别为30.87%、26.39%、16.09%、13.19%、6.86%和6.60%,A、B、O1等位基因频率分别为21.50%、26.39%和52.11%.根据遗传距离和聚类分析,海南汉族ABO血型分布介于北方和西北各省组与长江流域和西南区组之间,而海南黎族ABO血型分布与我国各省区的ABO血型分布4个组的聚类现象不明显.结论 海南汉、黎族人群ABO血型基因频率分布存在明显的种族和地域的遗传多态性.
关键词： 等位基因特异性聚合酶链反应 ABO血型 ABO基因 DNA多态性 -
FTA卡在微量血痕DNA多态性分析中的应用
目的 探索FTA卡样本DNA小检出量及同一FTA卡样本进行多项目检测的可行性.方法 制作含有不同浓度DNA FTA卡,使用Identifiler试剂盒进行检验;对同一FTA卡样本先后使用Identifiler、Y-filer试剂盒进行扩增及线粒体高变区HVI区测序,使用ABI3130测序仪检测各扩增产物.结果 载有0.5ngDNA的FTA卡扩增产物即可正确分型,对同一血痕样本使用不同试剂盒检验,均可清晰正确判型,线粒体高变区HVI区测序图清晰,且各检验结果均与对照一致.结论 载有0.5ngDNA的FTA卡扩增产物可用于DNA分型检测,FTA卡对DNA结合较稳定,可用于多项目检测.
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皖南地区汉族人群15个STR基因座遗传多态性
目前,短串联重复序列(short tandem repeat,STR)分型检测已被广泛应用于国内外法医学个人识别和亲权鉴定中.本文采用Identifiler荧光标记复合扩增系统对皖南地区汉族人群15个STR基因座(D8S1179、D21S11、D7S820、CSF1PO、D3S1358、TH01、D13S317、D16S539、D2S1338、D19S433、vWA、TPOX、D18S51、D5S818和FGA)遗传多态性进行调查,为法医学个体识别、亲权鉴定以及群体遗传学研究等提供基础数据.
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新疆维、汉族冠心病患者载脂蛋白E多态性研究
目的探讨新疆维、汉两民族冠心病患者载脂蛋白E(ApoE)基因多态性与冠心病的关系.方法用酚氯仿抽提核酸法从凝血块中分离DNA,用多聚酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对新疆维、汉两民族103例冠心病患者和54例对照组人群进行ApoE基因多态性(ε2,ε3和ε4决定的E2/2、E3/3、E4/4、E4/2、E4/3和E3/2)Hhal酶切研究.结果 (1)ApoE之ε2,ε3和ε4等位基因频率在冠心病组分别为0.073±0.215、0.777±0.311和0.151±0.241,与对照组(0.185±0.296,0.685±0.367和0.130±0.221)比较,ε2明显减低(P＜0.05),ε3和ε4虽有升高但无显著差别(P＞0.05).(2)由ε2到ε4低密度脂蛋白胆固醇(LDL)、总胆固醇(CT)和三酰甘油逐渐升高.ε2缺失与冠心病其他危险因子一起作Logistic回归分析,ε2缺失(危险比RR=3.45,P＜0.05)为冠心病的危险因子之一.结论新疆乌鲁木齐维、汉两民族人群中:(1)CAD患者ApoE基因之ε2等位基因频率明显降低,ε3和ε4有所升高;从ε2到ε4,LDL、TG和TC有升高趋势;(2)ApoE基因多态性(ε2等位基因缺失)为冠心病的危险因子之一,亦即ε2与冠心病负相关.
