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人硫氧化还原蛋白文献资料
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重组人硫氧化还原蛋白对原代培养肝细胞的影响
目的探讨重组人硫氧化还原蛋白(rhTrx)对原代培养肝细胞生存生长的影响.方法逆转录聚合酶链反应法扩增出hTrx cDNA,并在原核表达系统中表达.IgM还原实验和胰岛素还原实验测定rhTrx的生物学活性.3H胸腺嘧啶核苷(TdR)掺入试验和细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放试验检测rhTrx对SD大鼠原代培养肝细胞生存生长的影响.结果克隆出hTrx开放阅读框cDNA并获得高效表达,可溶性目的蛋白回收率为23.20%,蛋白纯度为96.30%.IgM还原和胰岛素还原实验均显示制备的rhTrx具有较好的生物学活性(t=7.5860,P＜0.01).加入rhTrx培养的肝细胞生长旺盛,并维持了良好的细胞形态.rhTrx可促进原代培养肝细胞的DNA合成,并以剂量依赖方式明显抑制乙醇造成的肝细胞损害.结论制备出具有生物学活性的rhTrx,hTrx对原代培养肝细胞的生存具有促进作用.
