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  • 兔脑死亡状态对肝脏蛋白质表达谱的影响

    作者:李玲;杜冰;范晓礼;钟自彪;王彦峰;叶啟发

    目的 分析兔脑死亡状态下肝脏存在的差异蛋白质,为揭示脑死亡状态下肝脏损伤的影响因素提供实验依据.方法 采用缓慢颅内加压法建立兔脑死亡模型.提取脑死亡后6h标本蛋白质进行双向凝胶电泳.利用PDQuest凝胶图像分析软件对图像进行分析.将两组间差异在2倍以上的蛋白质点行基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱鉴定.在NCBI数据库中检索,鉴定出相应的蛋白质,并用蛋白印迹法进行验证.结果 双向凝胶电泳显示,假手术组可检测到大约(973±34)个蛋白质点,脑死亡组可检测到大约(987±38)个蛋白质点.经成组比较共计有52个明显差异表达的蛋白质点,与假手术组相比,上调29个,下调23个.10个差异蛋白点分别为线粒体醛脱氢酶、过氧化物酶6、3磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1、3-巯基丙酮酸硫基转移酶、乙醇脱氢酶、二氢嘧啶酶相关蛋白4、Runt相关转录因子1、无机焦磷酸酶、谷氨酸-半胱氨酸连接酶的调节亚基、微粒细胞色素B5.其中,RUNX1是我们比较关注的一个蛋白.通过蛋白印迹法对RUNX1在各组织中的表达情况进行验证发现,随着脑死亡时间的延长,RUNX1在肝脏中的表达逐渐减少.结论 双向凝胶电泳结合质谱鉴定是差异蛋白质组学研究的可靠平台和有力工具,鉴定出的蛋白质RUNX1可能与脑死亡后肝脏损伤的发生、发展有关,有助于对脑死亡后肝脏损伤机制的了解.

  • miR-23a与RUNX1在恶性淋巴瘤中的表达及其临床意义

    作者:贺荣芳;赵强;王婧;谢黎明;张小丽;龚邵新

    目的:探讨miR-23a与runt相关转录因子(runt-related transcription factor 1,RUNX1)在恶性淋巴瘤中的表达及临床意义.方法:运用荧光素酶报告基因活性分析检测miR-23a与RUNX1基因3'UTR区结合情况.收集150例恶性淋巴瘤及30例反应性增生淋巴组织手术标本,分别运用原位杂交、免疫组织化学方法检测两组中miR-23a、RUNX1 的表达.结果:RUNX1 是miR-23a直接调控的靶基因.miR-23a在150例恶性淋巴瘤组织中阳性表达率为66.7%,显著高于反应性增生淋巴组织(30.0%,P<0.01),且与肿瘤恶性程度和临床分期密切相关(P<0.01);RUNX1蛋白在150例恶性淋巴瘤组织中阳性表达率为24.7%,显著低于反应性增生淋巴组织(53.3%,P<0.01),且与肿瘤组织学类型、恶性程度和临床分期密切相关(P<0.05);相关性分析表明,miR-23a与RUNX1的表达呈负相关(P<0.01).结论:RUNX1是miR-23a直接调控的靶基因,miR-23a的高表达和RUNX1蛋白低表达可能是恶性淋巴瘤发生发展的重要生物学标志.

  • 新型GATA-1相互作用蛋白质及其在造血调控中的作用

    作者:丁亚丽;李长燕;杨晓明

    GATA-1在造血干细胞的谱系分化中起关键的调控作用,为红系和巨核系发育成熟必不可少,对肥大细胞系及嗜酸性粒细胞系发育也有一定的调控作用.GATA-1的转录活性受到多层次的精确调节,其调控不同谱系分化的功能大多通过与不同的蛋白质相互作用来实施.近年来,多种新的GTAT-1相互作用蛋白质被确定,特别是GATA-1复合体的研究,揭示了GATA-1转录活性及其调控造血分化的新机制.

  • miR-23a与RUNX1在胃癌中的表达及其临床意义

    作者:贺荣芳;谢黎明;赵强;王婧;文龙;王艳;唐海林

    目的:探讨miR-23a与转录因子RUNX1在胃癌中的表达情况及意义.方法:运用荧光素报告基因活性分析检测miR-23a与RUNX1基因3'UTR区结合情况.收集胃癌患者手术标本(胃癌及癌旁组织)87例,分别运用原位杂交、免疫组化方法检测胃癌组织及癌旁组织中miR-23a,RUNX1的表达.结果:荧光素酶报告基因活性分析提示RUNX1是miR-23a的靶基因.在87例胃癌组织中miR-23a阳性表达率为82.76%,RUNX1蛋白阳性表达率为14.94%,与癌旁对照组(分别为25.29%,80.46%)比较,差异均具有统计学意义(P<0.01);有淋巴结转移组的miR-23a的表达明显高于无淋巴结转移组(P<0.01),且miR-23a的表达随着胃癌浸润深度和临床分期演进而上调(P<0.01);有淋巴结转移组的RUNX1的表达明显低于无淋巴结转移组(P<0.01),且RUNX1的表达随着胃癌浸润深度和临床分期演进而下调(P<0.01); miR-23a与RUNX1的表达呈明显负相关(r=-0.474,P=0.004).结论:RUNX1是miR-23a直接调控的靶基因;miR-23a高表达和RUNX1蛋白低表达可能是胃黏膜恶性转变以及发生浸润转移的重要生物学标志.

  • 胶原纤维、NCAM1和RUNX1在心肌桥供血心肌的表达

    作者:马英;刘云;唐任宽

    目的:探讨胶原纤维、神经细胞黏附分子1(NCAM1)和Runt相关转录因子1(RUNX1)在心肌桥(MB)供血心肌的表达情况。方法用Massion′s染色检测胶原纤维在无动脉粥样硬化MB供血心肌(A组)、动脉粥样硬化MB供血心肌(B组)、冠状动脉粥样硬化心脏病心肌(C组)、非心源性即刻死亡心肌中的(作为对照组,D组)分布;免疫组化检测NCAM1在上述心肌的表达情况;Western bolt检测其转录因子RUNX1的表达水平。结果 Massion′s染色显示B、C组心肌间质有较多胶原纤维,部分心肌坏死,形成纤维瘢痕;A、D组心肌间质几乎无胶原纤维。NCAM1在B组心肌表达呈阳性,呈棕黄或棕褐色,主要在细胞质及细胞膜表达;C组瘢痕灶附近心肌细胞膜及细胞质中呈阳性;A组和D组心肌表达呈弱阳性或阴性。NCAM1在A、D组供血心肌表达与B、C组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Western bolt检测RUNX1亦有相似的表达。结论 MB存在动脉粥样硬化将导致慢性心肌缺血。

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