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永生化肝细胞移植(文献综述)
肝细胞移植治疗肝脏疾病已有20多年的历史,但移植肝细胞增殖困难一直困绕着该项研究的进展.永生化肝细胞增殖能力强大,某些肝细胞前体细胞具备分化潜能,用于移植有助于此类问题的解决,本文就近年来的有关研究综述如下.
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可回复性肝细胞永生化载体pCTGTKlox的构建、鉴定、转染与表达
目的构建可回复性永生化逆转录病毒载体,为肝细胞可回复性永生化奠定基础.方法扩增加强型绿色荧光蛋白(EGFP)及胸腺激酶(TK)并采用重叠延伸拼接法(SOE)连接EGFP和TK,将EGFP-TK融合基因亚克隆至pBABE-puro-lox,构建成新载体pBGTKIox,再将永生化基因SV40T连接至pBGTKlox,构成新载体pBTGTKlox,后将雌激素受体与重组酶融合基因(Cre-ER)连接至pBTGTKlox,构成新载体pCTGTKlox.将pCTGTKlox和pPDF15质粒共转染包装细胞PT67,并在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达.免疫组化染色检测SV40T基因的表达.结果成功构建包含EGFP-TK、SV40T、Cre-ER及重组序列loxP的新载体pCTGTKlox,经酶切鉴定证实为重组阳性体,经测序验证无核苷酸突变.pCTGTKlox转染PT67细胞24h后,荧光显微镜下可见散在多处绿色荧光.免疫组化染色显示细胞胞核呈阳性染色.结论成功构建并表达可回复性永生化逆转录病毒载体pCTGTKlox,为细胞的可回复性永生化提供了一种良好的新型载体.
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生物人工肝的几种细胞来源
本文探讨了生物人工肝不同的种子细胞来源及其优缺点及其存在的问题和研究进展.
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可用于移植的肝细胞研究进展
肝细胞移植作为治疗暴发性肝功能衰竭及各种终末期肝病一种潜在方法,具有创伤小、安全简单、可一肝多用、重复移植、抗原性低等优点.可以用作移植的肝细胞种类很多,目前也有很多关于这方面的报道,本文就可用于移植的肝细胞的研究进展做一简单总结.
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生物人工肝的细胞来源及其研究进展
肝衰竭的病死率极高,生物人工肝(BAL)是治疗肝衰竭的重要措施.目前,肝细胞作为BAL的主要生物成分,其来源一直是BAL系统研究的重点及难点之一,现就BAL系统应用的肝细胞来源作一综述.
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生物人工肝细胞材料的研究进展
近年来,许多学者对生物人工肝(bioartificial liver,BAL)多种来源的细胞材料进行了广泛深入地研究和探索,但生物人工肝细胞材料的来源问题至今仍未得到满意解决.本文对近年来生物人工肝细胞材料研究进展进行综述,以期为建立和选择理想的生物人工肝细胞材料的深入研究提供参考.
关键词: 生物人工肝 细胞材料 HepG2/C3A细胞 永生化肝细胞 肝脏前体细胞 -
倒千里光碱处理SD大鼠永生化肝细胞同种脾内移植增殖实验研究
目的探讨倒千里光碱(Retrorsine,Rts)处理对SD大鼠永生化肝细胞同种脾内移植增殖效率的影响.方法SV40T抗原转染法制备永生化肝细胞.成熟SD大鼠24只,随机分为A、B、C 3组,A组为Rts处理SD大鼠永生化肝细胞移植组;B组为Rts处理SD大鼠正常肝细胞移植组;C组为正常SD大鼠永生化肝细胞移植组.A、B两组SD大鼠分2次腹腔注射Rts,间隔2周,第2次注射Rts4周后备用.20%肝叶切除后,3组SD大鼠分别行永生化肝细胞移植或肝细胞移植,常规病理切片检查脾内移植永生化肝细胞增殖效率,免疫组化检测脾脏内移植永生化肝细胞白蛋白表达,透射电镜检测移植永生化肝细胞形态.结果病理检查显示,肝细胞移植后3周内,3组SD大鼠脾脏内均可见移植肝细胞:免疫组化结果显示,3组SD大鼠脾脏实质内均可见散在棕黄色白蛋白颗粒,A组大鼠脾脏内肝细胞面数密度与B组比较无显著差异,但与C组有显著差异;透射电镜检测结果显示,脾内移植永生化肝细胞具有正常肝细胞的超微结构.结论脾内移植永生化肝细胞具有正常肝细胞的形态、结构及白蛋白表达功能;Rts可促进永生化肝细胞SD大鼠脾脏内移植的增殖效率.