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慢性乙型肝炎患者表位特异性CTL定量检测的评价
目的:评价慢性乙肝患者体内不同表位特异性细胞毒性T细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)的功能状态.方法:采用MHC/肽四聚体复合物技术,即tetramer技术,定量外周血HLA-A2限制性表位即核心抗原core18-27、被膜抗原env 183-191、335-343、聚合酶抗原pol 575-5834种表位特异性CTL,通过多元回归分析进行综合评价.结果:慢性乙肝患者体内存在多克隆CTL反应,core 18-27为优势生表位.4种表位特异性CTL的频率与病毒载量无相关性(P>0.05);表位特异性CTL与血清转氨酶水平均无显著相关性(P>0.05).结论:体内存在的CTL数量并不能代表机体的保护性免疫状态.
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MHC/肽四聚体复合物技术及其在T细胞研究中的应用
科学的进步促进技术的革命,而新技术的诞生则又进一步推动科学的飞跃发展.自1996年Altman[1]建立了新型的细胞毒性T细胞(Cytotoxic T Lymphocyte,CTL)检测技术-MHC I类分子-肽四聚体复合物标记CTL的流式细胞检测法,即tetramer技术以来,为解决CTL及其前体细胞的定量检测提供了新的手段,被诺贝尔奖获得者Doherty教授称赞这是在病毒特异性CTL和记忆性CTL方面的一项革命,目前已成为定量检测特异性CD8+T细胞的金标准[2].tetramer技术初作为直观、定量检测抗原特异性T细胞的工具,新近又结合细胞表面标志分子、胞内效应分子染色(如各种细胞因子、趋化因子、细胞毒素)以及通过对tetramer阳性T细胞进一步分选等,用于对T细胞的功能评估,使人们对T细胞的活化增殖、凋亡老化、效应机制以及潜在的治疗前景有了更为全新的认识.
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抗原特异性细胞毒T细胞检测及其临床意义
抗原特异性细胞毒T细胞(CTL)在控制病毒感染和某些肿瘤中具有重要作用.用MHC-Ⅰ类分子的α链和β2-微球蛋白、抗原肽和有荧光染料标记的联接蛋白组成的四聚体试剂,可以检测相应的抗原特异性CTL.这项技术将对病毒性疾病和肿瘤的发病机制、患者体内细胞免疫功能的了解具有重要的意义,也为这些疾病的细胞免疫治疗提供新的方法.
关键词: 抗原特异性细胞毒T细胞 病毒 肿瘤 流式细胞仪 四聚体复合物