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  • 丙型肝炎病毒干扰素敏感决定区聚合酶链反应检测方法的建立及应用

    作者:张剑平;徐道振;闫杰;何忠平;董庆鸣;戴旺苏;沈冰;魏红山;成军

    目的:建立一种以丙型肝炎病毒(HCV)干扰素敏感决定区(ISDR)特异性引物为基础的聚合酶链反应(PCR)方法,对HCVISDR进行序列测定.方法:根据GenBank中6株HCV全序列核苷酸序列,设计共同的外引物及三组ISDR型特异性内引物.建立了HCV ISDRPCR检测方法,对27例HCV基因型1b的慢性丙型肝炎患者血清HCV RNA进行测定,并对PCR阳性标本的产物进行多位点分析.结果:A组PCR结果阳性率为37%(10/27),A-B组为30%(8/27),A-C组为4%(1/27),A-B-C组为22%(6/27),三组均阳性者有5例为使用IFN治疗6-12 mo后定性PCR检测HCV RNA转阴,停药3 mo后PCR检测HCV RNA结果仍为阴性.结论:以ISDR特异性引物为基础的PCR法可靠、简便,可用于丙型病毒性肝炎患者对HCV进行敏感决定区的测定,用于以NS5A-ISDR突变数量来预测HCV基因型1b感染的患者对IFN的持续应答.

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