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BCL-7402细胞文献资料
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靶向Plk1的siRNA对肝癌细胞凋亡的影响
目的:观察靶向作用于Plk1的siRNA对肝癌细胞系BCL-7402细胞中Plk1基因和p53基因表达及细胞凋亡的影响,探求靶向该基因的治疗在肝癌基因治疗中的可行性及效应.方法:设计合成两对靶向作用于Plk1基因的双链siRNA序列,分别命名为siRNA1和siRNA2,应用脂质体法将其转入BCL-7402细胞中.实验分为siRNA1、siRNA2、无关对照及空白对照4组.通过RT-PCR检测各组细胞中Plk1mRNA表达的变化；Western blot检测各组细胞中Plk1和P53蛋白表达的变化；流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡的改变；透射电镜观察细胞超微结构的变化.结果:转染后24 h和48 h,Plk1 mRNA相对水平siRNA1组分别较无关对照组和空白对照组下降了50％、51％和60％、62％,siRNA2组分别较无关对照组和空白对照组下降了42％、42％和54％、56％,siRNA1组、siRNA2组的Plk1 mRNA相对水平与无关对照组和空白对照组相比有统计学差异(P＜0.01).Plk1蛋白表达的变化趋势与Plk1 mRNA的变化趋势相似,P53蛋白的表达随着Plk1表达的抑制而明显增加(P＜0.01).转染后24 h,转染组中G2/M期的细胞数量明显增加(P＜0.01).转染后48 h,转染组中出现大量的凋亡细胞,透射电镜下可见凋亡早期及晚期形态学改变.结论:靶向作用于Plk1的siRNA能够抑制肝癌细胞系BCL-7402细胞中Plk1基因的表达,同时增加53基因的表达,促进转染细胞的凋亡,提示Plk1基因在对肝癌细胞的细胞周期及凋亡的调控中起重要作用.
关键词： 小干扰RNA 保罗样激酶1 肝脏肿瘤 BCL-7402细胞 细胞凋亡
