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自噬基因 Beclin 1在膀胱癌发生和发展过程中作用与临床意义
目的探讨自噬基因 Beclin 1在膀胱癌发生、发展过程中作用与临床意义。方法采用免疫组化EnVi-sion法对40例膀胱癌组织与30例癌旁组织中的Beclin 1的表达情况进行检测，比较两种组织中Beclin 1的表达情况、对膀胱癌组织中Beclin 1的表达与临床病理参数的关系及Beclin 1的表达与膀胱癌患者预后的关系进行分析。结果①膀胱癌组织Beclin 1高表达率为35.00%，显著小于癌旁组织Beclin 1高表达率（100.00%）（ P ﹤0.001）；②膀胱癌组织中的Beclin 1的表达与病理分级、TNM分期、生长方式及淋巴转移有关（ P ﹤0.05），而与肿瘤大小及肿瘤数量无关（ P ﹥0.05）；③经COX多因素分析，病理分级、TNM分期、生长方式、淋巴转移及Beclin 1表达均与膀胱癌患者5年生存率相关的独立预后因素（P﹤0.01）。结论 Beclin1在膀胱癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织；Beclin1可能为膀胱癌一种潜在的独立预后因素；Beclin 1可作为临床诊断膀胱癌的生物学标志物及其治疗靶点。
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多西紫杉醇诱导宫颈癌HeLa细胞自噬性凋亡的研究
目的:观察多西紫杉醇对体外培养的宫颈癌HeLa细胞自噬性凋亡的影响,并初步探讨其可能的机制.方法:不同浓度(1、5、10、20、40 μg/mL)的多西紫杉醇处理体外培养的宫颈癌HeLa细胞6、12、24、48、72 h后,用MTT法测定其生长抑制率,倒置显微镜及透视电镜观察细胞形态学变化,通过流式细胞术分别测定细胞凋亡率、细胞周期分布,RT-PCR法检测自噬基因Beclin 1表达的变化情况.结果:多西紫杉醇呈剂量和时间依赖性抑制宫颈癌HeLa细胞增殖(P＜0.05);多西紫杉醇10μg/mL处理的HeLa细胞,早期(24 h内)可出现明显的细胞自噬性变化,细胞凋亡数明显增加,G_2/M期阻滞,且自噬基因Beclin 1的表达明显增高.结论:多西紫杉醇具有抑制宫颈癌HeLa细胞增殖、诱导细胞自噬性凋亡等作用,其机制可能与上调自噬基因Beclin 1的表达水平有关.
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胃癌组织中Beclin 1和PTEN蛋白的表达
目的:检测胃癌组织中自噬相关基因Beclin 1和P7EN蛋白的表达情况.方法:采用免疫组化SP法检测62例胃癌组织和36例正常胃组织中Beclin 1和PTEN蛋白的表达.结果:胃癌组织中Beclin 1和PTEN蛋白的阳性表达率分别为40.0%(25/62)和45.2%(28/62,均低于正常对照组的94.4%(34/36)和94.4%(34/36)(χ2分别为27.845、23.800,P均<0.001);胃癌组织分化程度越低,Beclin 1蛋白的阳性表达率越低(χ2=26.230,P<0.001);组织浸润深度越深、分化程度越低、伴淋巴结转移的胃癌组织PTEN阳性表达率越低(χ2=10.020、23.296和11.610,P均<0.001).胃癌组织中Beclin 1和PTEN的表达呈正关联(rP=0.578,P<0.001).结论:自噬活性的改变可能与胃癌的发生发展有关.
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自噬基因Beclin1对上皮性卵巢癌细胞SKOV3生长的抑制作用
目的 观察自噬基因Beclin 1在人卵巢癌细胞株SKOV3中过表达对肿瘤细胞在体内、体外生长活性的影响.方法 脂质体法将重组质粒pcDNA3.1/Beclin1转染人卵巢癌细胞株SKOV3,MTT法分析外源性Beclin1过表达对SKOV3增殖的影响,流式细胞仪检测转染后肿瘤细胞的凋亡及自噬情况.将重组质粒pcDNA3.1/Beclin1转染SKOV3细胞后,接种到裸鼠皮下,观察体内致瘤活性及生长情况;免疫组化检测瘤组织Beclin1蛋白的表达.结果 Beclin 1在SKOV3中的过表达后抑制肿瘤细胞在体外的生长,抑制率为58.68%;pcDNA3.1/Beclin1转染后SKOV3的凋亡率为(21.26±3.89)%,高于空质粒pcDNA3.1转染组和未转染组,差异有显著性(P<0.05);流式细胞仪检测pcDNA3.1/Beclin1转染后SKOV3细胞MDC平均荧光强度高于pcDNA3.1转染组和未转染组.重组质粒pcDNA3.1/Beclin1使SKOV3细胞在裸鼠体内成瘤时间延长,瘤体体积及质量明显小于空质粒组和空白对照组,抑瘤率为50.27%.结论 自噬基因Beclin1在人卵巢癌细胞SKOV3中过表达可抑制SKOV3在体内、体外的增殖,针对自噬基因Beclin1的卵巢癌基因治疗可能具有可行性.
