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内皮细胞条件培养液文献资料
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脐血来源的两种内皮祖细胞的分离、培养和鉴定
为了建立从人脐血分离培养两种内皮祖细胞的方法和培养体系,从脐血分离单个核细胞,在含有内皮细胞条件培养液的体系中培养得到两种细胞,利用摄取乙酰化低密度脂蛋白(acetylated low-density lipoprotein,DiI Ac-LDL)和结合欧洲荆豆凝集素(Ulex European Agglutinin 1,UEA-1)进行鉴定,并进一步用免疫细胞化学、RT PCR、流式细胞术对它们进行内皮细胞相关的表型检测.结果表明,这两种细胞均能摄取DiI-Ac-LDL和结合UEA-1,表达内皮细胞的标志如CD31、CD144和血管假性血友病因子(von Willebrand Factor,vWF),有CD31、酪氨酸激酶受体(kinase tyrosine insert domain receptor,KDR)、CD144和内皮一氧化氮合成酶(endothelial NO synthase,ENOS)的基因转录.但是,它们的增殖能力明显不同,分别称为循环成血管细胞和高增殖潜能内皮祖细胞.流式细胞计数结果显示,这两种细胞在一些表面标志表达方面也存在明显的差异.结论:利用含内皮细胞条件培养液的培养体系,成功地从脐血分离的单个核细胞中培养得到了两种内皮祖细胞.
