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巨细胞病毒感染的细胞微丝骨架重组异常
本研究探讨巨细胞病毒(CMV)感染对人胚成纤维细胞(HF)微丝骨架影响及与病毒复制状态的可能关系. 用显微镜观察细胞形态,采用RT-PCR检测β-actin 表达,Western-blot检测胞内肌动蛋白质含量,间接免疫荧光标记病毒即刻早期抗原(IE)与微丝骨架探针观察HF细胞内感染状况及微丝骨架变化.结果表明: CMV感染率大于95%,IE抗原主要位于胞核.受染细胞变粗、变圆,甚至脱壁,呈时间依赖性.感染后72、96小时,受染细胞内β-actin表达呈渐进性下调,差异显著(P<0.05);96小时后胞内β-actin含量则为未感染组的(74.2±13.4)%,差异显著(P<0.05).受染细胞内微丝排列紊乱,极性消失;细胞融合,荧光强度明显减弱.结论: CMV引起细胞内肌动蛋白质、微丝骨架形态及重组异常可能有助于其侵袭宿主细胞并进一步活化及复制.
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大鼠不同脏器β-actin mRNA稳定性差异的实验研究
目的 检测大鼠心、肝、脾、肾β肌动蛋白(β-actin)mRNA在死后不同时间的表达,为死亡时间的推断寻求客观依据.方法 大鼠麻醉致死后置于18℃温度控制系统模拟死后改变,在不同时间点抽提相应组织总mRNA,利用RT-PCR技术检测β-actin mRNA的表达水平变化并对扩增产物进行半定量分析.结果 大鼠心脏β-actin mRNA在死后10天内都可以检测到,肝脏β-actin mRNA在死后4天内都可以检测到,脾脏β-actin mRNA在死后12天内都可以检测到,肾脏β-actin mRNA在死后8天内都可以检测到.结论 观测死后心、肝、脾、肾β-actin mRNA的变化,可为死亡时间推断提供客观依据.
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根据mRNA稳定性推断死亡时间的研究
目的检测大鼠肺、胸肌β肌动蛋白(β-actin)mRNA在死后不同时间的表达,为死亡时间的推断寻找新的指标.方法大鼠断颈处死后于21℃温度控制系统模拟死后改变,在不同时间点抽提相应组织总RNA,利用RT-PCR技术检测β-actin mRNA的表达水平变化并对扩增产物进行半定量分析.结果大鼠肺β-actinmRNA于死后12d仍可检出,胸肌在死后8d的检测呈阴性.β-actin mRNA在肺脏和胸肌的稳定性呈现器官差异性和时间差异性.结论观察死后肺、胸肌β-actin mRNA的变化,可为死亡时间推断提供客观依据.