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基因工程小鼠文献资料
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构建KrasLSL-G12D/-和Smad4loxp/loxp双转基因散发性结直肠癌小鼠模型
目的 构建并验证一种与临床散发性结直肠癌类似且同时表达KrasLSL-G12D/-和Smad4loxp/loxp的双转基因小鼠模型.方法 将Krastm4Tyj/J小鼠与Smad4tm2.1Cxd/J小鼠转换遗传背景后进行杂交建系,通过聚合酶链式反应技术鉴定子代小鼠基因型,获得基因型为KrasLSL-G12D/-+Smad4loxp/loxp的双转基因小鼠模型.通过向双转基因模型小鼠的肠黏膜下注射LentivirusCre-IRES-Luciferase,在IVIS系统下观察并统计双转基因模型小鼠的成瘤情况,对其瘤变组织进行取样并行苏木精-伊红染色法染色,以验证双转基因模型小鼠的成瘤能力.结果 经培育筛选获得了能够同时表达KrasLSL-G12D/-和Smad4loxp/loxp的双转基因小鼠模型;通过构建的病毒载体利用Cre重组酶成功感染并诱导小鼠肠上皮细胞突变而形成癌灶.结论 本研究构建的KrasLSL-G12D/-+Smad4loxp/loxp双转基因模型小鼠的结肠上皮细胞能在Cre重组酶作用下诱导癌变,模拟了人类散发性结直肠癌的病理过程.
